一种通过诱变提高红霉素生产菌对正丙醇的耐受性的方法

摘要

本发明公开了一种通过诱变提高红霉素生产菌对正丙醇的耐受性的方法，包括以下步骤：（1）以红霉素生产菌为出发菌株，将红霉素生产菌在斜面培养基上预培养7天。（2）预培养后的红霉素生产菌进行紫外线诱变：用15W功率的紫外灯管和固定距离为20cm的条件下照射3分钟进行诱变，诱变后立即涂培养基平板。（3）诱变后活菌落进行离子束辐照诱变：诱变温度为25℃，诱变剂量为55Gy，诱变后再经培养基平板初筛和摇瓶发酵方法复筛，所得活菌落即为对正丙醇具耐受性的突变红霉素生产菌。通过本方法，得到对高浓度正丙醇具耐受性的突变红霉素生产菌，其对正丙醇的耐受浓度达到2%以上。提高了红霉素生产菌对正丙醇的耐受性，使在培养基中可显著增加正丙醇浓度，在生产菌种转化率不变的情况下，正丙醇浓度提高使红霉素的产量得到提高，100L发酵罐放罐效价可达到13000u/ml以上。

主权项

一种通过诱变提高红霉素生产菌对正丙醇的耐受性的方法，其特征依次包括以下步骤：（1）将红霉素生产菌在斜面培养基上培养，34℃，培养7天后获得新鲜成熟孢子；（2）将红霉素生产菌新鲜成熟斜面制成孢子悬液，孢子量在1×106个/mL，取5mL孢子悬液移至培养皿中，于15W紫外线灯管和固定距离20cm照射3分钟，诱变后进行梯度稀释立即涂培养基平板；（3）挑取步骤（2）诱变后活菌落进行离子束辐照诱变：诱变温度为25℃，诱变剂量为55Gy，诱变后进行梯度稀释涂培养基平板初筛；挑单菌落至斜面培养基，34℃，培养7天，再经摇瓶发酵方法进行复筛，所得突变菌即为对正丙醇具耐受性的高产红霉素生产菌。