肠出血性大肠杆菌O104︰H4检测试剂盒

摘要

本发明提供一种肠出血性大肠杆菌O104:H4检测试剂盒，包含PCR反应液，所述PCR反应液包含第一反应液、第二反应液及稳定剂，所述第一反应液包含以wzy(O104)、fliC(H4)和aggR基因为靶基因，并用于荧光定量PCR的wzy(O104)基因的引物探针、fliC(H4)基因的引物探针和aggR基因的引物探针。本发明还提供一种肠出血性大肠杆菌O104:H4检测试剂盒的使用方法，所述方法具有快速准确、特异性强、操作简便且不会出现假阳性的优点。

主权项

一种肠出血性大肠杆菌O104︰H4检测试剂盒，包含PCR反应液，所述PCR反应液包含第一反应液、第二反应液及稳定剂，所述第一反应液包含以wzy(O104)、fliC(H4)和aggR基因为靶基因，并用于荧光定量PCR的wzy(O104)基因的引物探针、fliC(H4)基因的引物探针和aggR基因的引物探针，其中，所述wzy(O104)基因的引物探针为：wzy(O104)基因的引物:49F:5’‑TTAGTTCATTAGATCGAGGT‑3’(SEQ ID NO:1)，49R:5’‑TCCAAAATAACTTTGAACACA‑3’(SEQ ID NO:2)，wzy(O104)基因的探针：49A:5’‑(FAM)CTTGTCTTTGCAGTCTACT(DABCYL)‑3’(SEQ ID NO:3);所述fliC(H4)基因的引物探针为：fliC(H4)基因的引物：50F:5’‑GTCTGCGTATTAACAGCGCTA‑3’(SEQ ID NO:4)，50R:5’‑GCCTGAGTCAGACCTTTGATGT‑3’(SEQ ID NO:5)，fliC(H4)基因的探针：50H:5’‑(HEX)GCCAGGCGATTGCTAACCG(DABCYL)‑3’(SEQ ID NO:6);所述aggR基因的引物探针为：aggR基因的引物：51F:5’‑GCAATACATATCTTAGAAATG‑3’(SEQ ID NO:7)，51R:5’‑CGTCTTAATGTATCGCTGC‑3’(SEQ ID NO:8)，aggR基因的探针：51X:5’‑(ROX)AATATATCAGTAAGATTGC‑3’(SEQ ID NO:9)。