| 发明名称 | 一种从抗虫棉种子中纯化Bt毒蛋白的方法 | ||
| 摘要 | 本发明公开了一种从抗虫棉种子中纯化Bt毒蛋白的方法。本发明提供的从抗虫棉种子中纯化Bt Cry1Ac蛋白的方法，包括如下步骤：（1）将抗虫棉种子去壳后进行可溶性总蛋白的提取，得到溶液甲；（2）将所述溶液甲进行60%饱和度的硫酸铵沉淀，离心收集沉淀；（3）溶解步骤（2）得到的沉淀并进行透析，得到溶液乙；（4）将所述溶液乙进行免疫亲和层析，收集与抗Bt Cry1Ab/Ac蛋白的单克隆抗体特异结合的蛋白组分，即为Bt毒蛋白；所述抗Bt Cry1Ab/Ac蛋白的单克隆抗体为是由杂交瘤Bt2F9 CGMCC No.5162分泌产生的单克隆抗体。本发明具有以下优点：（1）简化了纯化流程，降低了纯化成本；（2）缩短了纯化时间，减少了目的蛋白损失。 | ||
| 申请公布号 | CN103145815A | 申请公布日期 | 2013.06.12 |
| 申请号 | CN201310070417.0 | 申请日期 | 2013.03.06 |
| 申请人 | 中国农业大学 | 发明人 | 王保民;张亮;曹振;郭素琴;谭桂玉;南铁贵;李召虎 |
| 分类号 | C07K14/325(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I;C07K1/34(2006.01)I;C07K1/30(2006.01)I;C07K1/22(2006.01)I | 主分类号 | C07K14/325(2006.01)I |
| 代理机构 | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人 | 关畅 |
| 主权项 | 一种从抗虫棉种子中纯化Bt毒蛋白的方法，包括如下步骤：（1）将抗虫棉种子去壳后进行可溶性总蛋白的提取，得到溶液甲；（2）将所述溶液甲进行60%饱和度的硫酸铵沉淀，离心收集沉淀；（3）溶解步骤（2）得到的沉淀并进行透析，得到溶液乙；（4）将所述溶液乙进行免疫亲和层析，收集与抗Bt Cry1Ab/Ac蛋白的单克隆抗体特异结合的蛋白组分，即为Bt毒蛋白；所述抗Bt Cry1Ab/Ac蛋白的单克隆抗体为是由杂交瘤Bt2F9CGMCC No.5162分泌产生的单克隆抗体。 | ||
| 地址 | 100193 北京市海淀区圆明园西路2号 | ||