发明名称 基于单分子计数的肿瘤相关蛋白的检测方法
摘要 本发明公开了一种基于单分子计数的肿瘤相关蛋白的检测方法。本发明提供的肿瘤相关蛋白的检测方法,包括如下步骤:1)将待检测的肿瘤相关蛋白分子通过配体和受体的特异性相互作用、或者抗体和抗原的特异性相互作用捕获于玻璃片上,然后往所述玻璃片上加入经荧光标记的针对所述待检测的肿瘤相关蛋白分子的抗体,得到待检测的玻璃片;2)将步骤1)得到的待检测的玻璃片置于全内反射显微镜的物镜上,进行肿瘤相关蛋白的检测。本发明属于蛋白质检测方法,与同类技术相比具有操作简便,检测灵敏度高,样品使用量小,无需酶放大等优势,可以检测低浓度蛋白质分子。
申请公布号 CN101833004B 申请公布日期 2013.06.12
申请号 CN201010166334.8 申请日期 2010.05.07
申请人 中国科学院化学研究所 发明人 方晓红;张伟;周松
分类号 G01N33/574(2006.01)I;G01N33/577(2006.01)I;G01N33/52(2006.01)I 主分类号 G01N33/574(2006.01)I
代理机构 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 代理人 关畅;任凤华
主权项 1.一种肿瘤相关蛋白的检测方法,包括如下步骤:1)将待检测的肿瘤相关蛋白分子通过配体和受体的特异性相互作用、或者抗体和抗原的特异性相互作用捕获于玻璃片上,然后往所述玻璃片上加入经荧光标记的针对所述待检测的肿瘤相关蛋白分子的抗体,得到待检测的玻璃片;2)将步骤1)得到的待检测的玻璃片置于全内反射显微镜的物镜上,进行肿瘤相关蛋白的检测;所述待检测的肿瘤相关蛋白分子是血小板源性生长因子β受体;步骤1)中,所述待检测的玻璃片的制备方法包括如下步骤:a)将牛血清蛋白BSA吸附在玻璃片上;b)在步骤a)的基础上往所述玻璃片上加入戊二醛,使得所述戊二醛与所述牛血清蛋白BSA交联;c)在步骤b)的基础上往所述玻璃片上加入血小板源性生长因子-DD,使得所述血小板源性生长因子-DD与所述戊二醛相交联;d)在步骤c)的基础上往所述玻璃片上加入所述血小板源性生长因子β受体;e)在步骤d)的基础上往所述玻璃片上加入经荧光标记的针对所述血小板源性生长因子β受体的抗体,得到待检测的玻璃片;所述肿瘤相关蛋白的检测方法为非疾病治疗方法和非疾病诊断方法。
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