利用[Co(NH₃)₆]³⁺-DNA共振光散射探针定量检测蛋白质的方法

摘要

本发明公开了一种利用[Co(NH3)6]3+-DNA(脱氧核糖核酸)共振光散射(RLS)探针定量检测蛋白质的方法。本发明利用[Co(NH3)6]3+-DNA复合物与蛋白质之间强的静电作用，引起蛋白质的共振光散射信号的强烈增强，来检测标准牛血清白蛋白(BSA)。在波长346.0nm处增强的共振光散射强度与BSA的浓度在0.05～1.2μg/mL范围内有良好的线性关系。本发明应用于人血清白蛋白等多种蛋白质的共振光散射响应值差别的比较，以及实际人血清样品中总蛋白含量的测定，均取得好的效果。方法灵敏度较高，准确可靠，检测体系简单，为定量检测痕量蛋白质建立了一种实用的新方法。

主权项

一种利用[Co(NH3)6]3+‑DNA共振光散射探针定量检测蛋白质的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)依次加入小牛胸腺ctDNA溶液、Britton‑Robinson(BR)缓冲溶液、[Co(NH3)6]Cl3溶液，最后分别加入1组已知浓度的标准组蛋白质溶液，和待测的未知浓度的实验组蛋白质溶液，各个混合溶液摇匀稀释；(2)步骤(1)所得的各混合溶液分别放置1小时后，在200.0nm～700.0nm下进行同步荧光扫描，获得其共振光散射光谱，并在346.0nm处测定共振光散射强度；(3)结合标准组蛋白质溶液的浓度(C)与其增强的共振光散射强度(ΔI)绘制标准曲线，得到ΔI与C之间的线性回归方程，以及该方法测量蛋白质的线性范围；(4)根据测量蛋白质标准曲线的回归方程和实验组蛋白质溶液增强的共振光散射强度，计算实验组蛋白质溶液的浓度。