一种检测蛋白的方法

摘要

本发明提供了一种检测蛋白的方法。该方法包括如下步骤：1)将待测蛋白进行凝胶电泳，使待测蛋白得到分离，并以条带形式或点的形式分布在凝胶上，将得到的凝胶记作带有蛋白条带或蛋白点的凝胶；2)将所述带有蛋白条带或蛋白点的凝胶置于量子点溶液中，浸泡，所述量子点与所述带有蛋白条带或蛋白点的凝胶中的蛋白条带或蛋白点结合，得到蛋白条带-量子点结合体或蛋白点-量子点结合体，将得到的凝胶记作带有蛋白-量子点结合体的凝胶；3)将所述带有蛋白-量子点结合体的凝胶进行凝胶成像实现所述待测蛋白的检测。实验证明，在进行单向电泳时，本发明方法的分辨率高，检测到的蛋白条带清晰，而对照组得到的条带非常模糊，不易分辨；在进行双向电泳时，本发明方法检测到的蛋白点多，而对照组得到的蛋白点非常少。该方法克服了目前所报道的量子点标记后进行蛋白凝胶分离而降低电泳淌度，进而降低分离效率的缺点；得到的荧光信号强且稳定、背景低、灵敏度高。

主权项

一种检测蛋白的方法，包括如下步骤：1)将待测蛋白进行凝胶电泳，使待测蛋白得到分离，并以条带形式或点的形式分布在凝胶上，将得到的凝胶记作带有蛋白条带或蛋白点的凝胶；2)将所述带有蛋白条带或蛋白点的凝胶置于量子点溶液中，浸泡，所述量子点与所述带有蛋白条带或蛋白点的凝胶中的蛋白条带或蛋白点结合，得到蛋白条带‑量子点结合体或蛋白点‑量子点结合体，将得到的凝胶记作带有蛋白‑量子点结合体的凝胶；3)将所述带有蛋白‑量子点结合体的凝胶进行凝胶成像，得到所述待测蛋白的凝胶电泳图像，即实现所述待测蛋白的检测；所述量子点溶液为如下a)、b)或c)所示：a)所述量子点溶液是按照包括如下步骤的方法配制得到的：将所述量子点溶于水中，再调节pH值至3.6‑4.4，得到所述量子点溶液；所述量子点在所述量子点溶液中的浓度为0.1mmol/L‑0.3mmol/L；b)所述量子点溶液由所述量子点、可溶性碱和水组成，所述量子点在所述量子点溶液中的浓度为0.2mmol/L‑0.325mmol/L，所述可溶性碱在所述量子点溶液中的浓度为1.8‑3.0mol/L；c)所述量子点溶液由所述量子点、可溶性碱、N，N，N’，N’‑四甲基乙二胺和水组成，所述量子点在所述量子点溶液中的浓度为0.2mmol/L‑0.325mmol/L，所述可溶性碱在所述量子点溶液中的浓度为1.8‑3.0mol/L，所述N，N，N’，N’‑四甲基乙二胺在所述量子点溶液中的浓度为9.9mmol/L‑26.5mmol/L；所述量子点的结构如下：所述量子点由核心层和壳层组成，核心层为碲化镉，壳层为巯基乙酸，壳层通过静电作用覆盖于核心层的周围；静电作用是指巯基乙酸中带孤对电子的S与碲化镉中带正电荷的Cd之间形成的静电作用；和/或，所述量子点的粒径为3‑5nm；和/或，所述量子点的发射波长为520nm；和/或，所述量子点的激发波长为250nm‑380nm；所述凝胶成像为在紫外光激发下进行荧光成像；和/或，所述凝胶为聚丙烯酰胺凝胶；所述a)所示的量子点溶液中，是用巯基乙酸或巯基乙酸的水溶液调节pH值的，所述巯基乙酸在所述量子点溶液中的体积百分含量为0.4％‑0.6％；所述b)所示的量子点溶液中，所述可溶性碱为氢氧化钠或氢氧化钾；所述c)所示的量子点溶液中，所述可溶性碱为氢氧化钠或氢氧化钾。