一种目的蛋白制备方法及其用途

摘要

本发明涉及一种目的蛋白制备方法及其用途。其制备方法为，目的蛋白核苷酸序列片段的获得；目的蛋白重组表达载体的构建；目的蛋白的诱导表达；纯化；切割；目的蛋白核苷酸序列片段的前面插入单体切割的识别位点；优选可在目的蛋白的核苷酸序列片段上游引入kex2酶切位点，在下游引入盐酸羟胺切割位点；目的蛋白的核苷酸序列片段通过SOE技术获得，并通过引物引入单体切割的识别位点；目的蛋白可以是人神经生长因子，胸腺肽、虎纹克胰肽、虎纹镇痛肽等。制备得到的目的蛋白表达量高、易于纯化、基因表达产物即为目的蛋白单体，不带额外氨基酸残基，既保证了目的蛋白产物良好的生物学活性，也省去了多拷贝的切割成本，纯化简单，易于大量生产。

主权项

一种目的蛋白的制备方法，其特征是：包括如下步骤，目的蛋白核苷酸序列片段的获得；目的蛋白重组表达载体的构建；目的蛋白的诱导表达；目的蛋白的纯化；纯化产物的切割；所述目的蛋白的核苷酸序列片段的前面插入单体切割的识别位点；优选地，在目的蛋白的核苷酸序列片段上游引入kex2酶切位点，在下游引入盐酸羟胺切割位点；所述目的蛋白的核苷酸序列片段通过SOE技术获得，通过引物引入单体切割的识别位点；优选的，目的蛋白是人神经生长因子，胸腺肽、虎纹克胰肽、虎纹镇痛肽。