发明名称 | 用于双峰驼线粒体DNA异质性的检测方法 | ||
摘要 | 本发明涉及一种用于双峰驼线粒体DNA异质性的检测方法,包括以下步骤:(1)扩增线粒体DNA异质性片段:根据双峰驼线粒体D-loop区序列,在相对保守区域设计一对引物,扩增该重复片度;PCR扩增体系为20μL,反应程序为:95℃预变性5min,94℃变性45s,62℃退火1min,72℃延伸1min,72℃延伸15min,35个循环;(2)DNA测序仪片段分析:经琼脂糖凝胶电泳检测合格后,稀释并上DNA测序仪进行片段分析;GeneMapper软件分析原始数据,进行标准曲线校对和片段分析。本发明的检测方法时间短、灵敏度高、分辨率高(可以区分1bp的差异)、适合大批量检测,可快速、批量进行400bp以内的专用于双峰驼线粒体DNA异质性分析。 | ||
申请公布号 | CN103131783A | 申请公布日期 | 2013.06.05 |
申请号 | CN201310073218.5 | 申请日期 | 2013.03.07 |
申请人 | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 | 发明人 | 何晓红;马月辉;关伟军;浦亚斌 |
分类号 | C12Q1/68(2006.01)I | 主分类号 | C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 | 北京双收知识产权代理有限公司 11241 | 代理人 | 王菲 |
主权项 | 用于双峰驼线粒体DNA异质性的检测方法,其特征在于:包括以下步骤:(1)扩增线粒体DNA异质性片段:根据双峰驼线粒体D‑loop区序列,在相对保守区域设计一对引物,扩增该重复片度;PCR扩增体系为20μL,反应程序为:95℃预变性5min,94℃变性45s,62℃退火1min,72℃延伸1min,72℃延伸15min,35个循环;(2)DNA测序仪片段分析:经琼脂糖凝胶电泳检测合格后,稀释并上DNA测序仪进行片段分析;GeneMapper软件分析原始数据,进行标准曲线校对和片段分析。 | ||
地址 | 100193 北京市海淀区圆明园西路2号 |