神经生长因子基因定位改造动物及其制备方法和应用

摘要

本发明涉及通过转基因方法获得的动物及其制备方法和应用。具体地，本发明涉及利用胚胎干细胞(ES)培养技术和同源重组技术将目的基因定位整合到小鼠基因组中，从而获得稳定表达目的基因的转基因动物。该方法得到的动物可以应用于基础研究和获得目的蛋白。更具体地本发明涉及使用神经生长因子基因定位改造小鼠及其制备人源性神经生长因子及其突变体蛋白质的方法和应用。

主权项

一种获得转基因啮齿类动物的方法，其特征在于通过同源重组技术使所述动物的NGF‑β基因被改变，进而使该动物表达该动物NGF‑β的突变体蛋白质，其中，所述NGF‑β的突变体蛋白质为SEQ ID NO:23所示基因编码的人源NGF‑β蛋白质；所述啮齿类动物为小鼠；所述同源重组技术包括以下步骤：1）构建打靶载体，其中所述载体含有SEQ ID NO:23所示的人源NGF‑β蛋白质编码基因；2）使用步骤1）中所构建的打靶载体转染小鼠胚胎干细胞；3）制备供体囊胚；4）将步骤2）中获得的经过转染的小鼠胚胎干细胞显微注射入步骤3）中所获得的供体囊胚中；5）将步骤4）中所获得的供体囊胚转移到受体动物的子宫中；以及6）获得转基因动物。