一种植物免疫蛋白的制备方法

摘要

本发明具体公开了一种植物免疫蛋白的制备方法，包括以下步骤：先从毕赤酵母菌的种管中挑取少量菌体并转移到固体PDA培养基上，在28℃～37℃的恒温培养箱中培养至少24h；再从所述固体PDA培养基上挑取少量菌体接种到PDA液体培养基中，在180rpm～200rpm、37℃的条件下振荡培养至少24h；对培养后的菌体进行剪切以破碎菌体细胞，得到粗蛋白溶液；向粗蛋白溶液中加入硫酸铵，使其终浓度达到20％，离心后收集沉淀；将沉淀重新溶解得到蛋白液，并将蛋白液加入到载体中，混合均匀后进行喷雾干燥制得植物免疫蛋白。本发明的制备工艺操作简单、成本低、产量大、产品质量好。

主权项

一种植物免疫蛋白的制备方法，包括以下步骤：（1）菌体培养：先从发酵毕赤酵母（Pichia fermentans）的种管中挑取少量菌体并转移到固体PDA培养基上，在28℃~37℃的恒温培养箱中培养至少24h；再从所述固体PDA培养基上挑取少量菌体接种到PDA液体培养基中，在180rpm~200rpm、37℃的条件下振荡培养至少24h，所述发酵毕赤酵母的保藏号为CGMCC 2.1838；（2）细胞破碎：对经过上述步骤（1）培养后的菌体进行剪切以破碎菌体细胞，所述剪切是在含该菌体的菌液中进行，剪切后得到粗蛋白溶液；（3）沉淀蛋白：向所述粗蛋白溶液中加入硫酸铵，使硫酸铵终浓度达到20%，离心后收集沉淀；（4）喷雾干燥：将沉淀重新溶解到缓冲液中得到蛋白液，并将该蛋白液按5∶1的混合比加入到蛋白质载体中，混合均匀后进行喷雾干燥制得植物免疫蛋白；所述植物免疫蛋白即为NAC蛋白。