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岩白菜素在动物体内代谢产物的测定方法，其特征是，包括步骤如下：（1）将给药后的待测血浆、尿液、胆汁样及未给药的空白血浆、尿液、胆汁样分别按体积比0.3:2加入乙腈，涡旋混合1‑3min，10800rpm速度离心2‑5min，取上清液，40°C水浴中用氮气吹干后，加入原样体积1/3的乙腈复溶；将给药后待测粪便及未给药的空白粪便按比例500:4，mg:mL第一次加入乙腈，涡旋3‑5min后将混悬液超声1h，5000rpm速度离心8‑10min，分离获得上清液I，剩余下层另加入乙腈，重复上述步骤获得上清液II，混合上清液I和II，40°C水浴中用氮气吹干后，加入第一次用量5%的乙腈复溶；（2）将上述制备的各待测液分别取10μL进样，高效液相色谱/四极杆‑飞行时间/串联质谱进行分析，色谱柱为C18，柱温25°C，流动相A为水，流动相B为乙腈，先后以流动相比例为5%–95%B流动0–20min，95%B流动20–22min，95%‑5%B流动22‑25min，流速：0.8ml/min；离子源为ESI源，负离子模式，喷雾气压力350Pa，干燥气流速10.0L·min‑1，干燥气温度为350℃，毛细管电压3500V，碎片电压选择120V；质量数扫描范围m/z 100～1000；上述条件下得到各待测液总离子流色谱图；（3）用代谢物鉴定软件对空白样本和给药样本总离子流色谱图对比，然后对空白样本和给药样本总离子流色谱图提取离子与二级碎片进行对比鉴定，得到岩白菜素M0：m/z,327.07，三种代谢产物M1：m/z,503.11，M2：m/z,407.03，M3：m/z,359.09；（4）对比分析M1、M2、M3与岩白菜素的二级碎片得出岩白菜素在动物体内代谢产物为葡糖醛酸结合产物，硫酸结合产物，水解和甲基结合产物。 |
