一种血液中稀有细胞的分离方法

摘要

本发明公开了一种血液中稀有细胞的分离方法，翻转微芯片使微芯片处于不同的三个状态，第一个状态：PBS缓冲液将微芯片内的空气排出；第二个状态：让血液样本流经微芯片，进行检测，微流体通道位于磁铁的下方，此时利用磁铁和微磁场对稀有细胞的磁力和稀有细胞重力的方向相反的原理将稀有细胞从血液样本中分离出来；第三个状态：将微芯片处于垂直状态，提高稀有细胞和血红细胞的分离效率。在检测结束后，微芯片处于垂直状态，便于将附有肿瘤细胞的载玻片从微芯片中取出，进行后续分析。三个状态完成了对稀有细胞的分离。

主权项

一种血液中稀有细胞的分离方法，其特征在于具体步骤如下：   1）准备两个存储器、一个抽吸泵、一个注射泵和一个微芯片，微芯片包括具有凹槽的薄片和载玻片，薄片上设置有进液口和出液口，薄片设置在载玻片上形成一个微流体通道；磁铁位于该载玻片底部，并沿着载玻片的长度形成梯度的磁场分布，载玻片用来采集微芯片捕获的稀有细胞；2）先将第一存储器通过第一连接管与微芯片的进液口连通，抽吸泵通过第二连接管与微芯片的出液口连通；注射泵与第一存储器连接；利用注射泵向第一存储器注入PBS缓冲液，设定微芯片的转动中心，该转动中心位于第一连接管上，该转动中心靠近微芯片，转动微芯片使微芯片与水平面成20‑40度角，磁铁位于载玻片的上方，微芯片的出液口低于微芯片的进液口，利用抽吸泵将第一存储器内的PBS缓冲液抽吸到微芯片内，将微芯片内的空气排出；3）将存放血液的第二存储器替换掉第一存储器，转动微芯片使微芯片成水平状态，微芯片的进液口或出液口朝下，然后第二存储器做晃动动作，防止血液沉淀，利用注射泵将第二存储器内的血液注射入微芯片中，然后微芯片静止1‑5个小时，血液在抽吸泵的作用下缓慢经过微芯片内的微流体通道，载玻片采集微芯片捕获的稀有细胞；4）当微芯片内的血液稀少时，用注射泵向第二存储器内注入少量PBS缓冲液，第二存储器做晃动动作，防止PBS缓冲液沉淀，开启抽吸泵，第二存储器内的PBS缓冲液流入微芯片中，此过程对微芯片作清洗，重复清洗2‑4次；5）转动微芯片使微芯片处于垂直状态，微芯片的进液口高于出液口，便于血红细胞在重力作用下流出微芯片；在检测结束后，将附有肿瘤细胞的载玻片从微芯片中取出，进行后续分析。