一种高寒地区黄菇菌丝多糖的提取方法

摘要

本发明涉及了一种黄菇菌丝多糖的制备方法。本发明提供了一种从黄菇菌丝体提取黄菇菌丝多糖的可行方法。本发明还提供了提取黄菇菌丝多糖的最佳提取条件。具体工艺过程为：接种黄菇菌丝，经发酵培养，对产黄菇多糖的发酵条件进行优化，确定实验最佳条件，在此基础之上，进行多批次的5L小型发酵实验，对发酵液离心收集菌丝体，烘干粉碎，采用超声波辅助热水浸提法提取黄菇中的真菌多糖，得到多糖浸提液。最后，黄菇菌丝多糖经过的浓缩、脱蛋白、脱色、分离精制和干燥，得到多糖干品。与传统的多糖提取方法比较，本发明工艺可操作性强，设备简单，无需试剂和化学反应，成本低，有效地缩短了提取时间，提高了多糖得率。

主权项

一种高寒地区黄菇菌丝多糖的制备方法，其步骤是：1.真菌的发酵培养①PDA斜面培养基：将一定量的马铃薯洗净去皮切碎，加水煮沸30min，用纱布过滤，向其中加入葡萄糖和琼脂，自然pH，1.05Kg/cm2灭菌20min。②种子培养基：将一定量的马铃薯洗净去皮切碎，加水煮沸30min，用纱布过滤，向其中加入葡萄糖，自然pH，1.05Kg/cm2灭菌20min。③发酵培养基：将一定量的马铃薯洗净去皮切碎，加水煮沸30min，用纱布过滤，向其中加入葡萄糖，自然pH，1.05Kg/cm2灭菌20min。将黄菇菌丝接种在PDA斜面培养基上，于28℃恒温培养4‑10天后，置于4℃冰箱中备用。将菌种经活化培养后的菌丝体接入种子培养基中，在28℃条件下振荡培养4‑10天，制得菌种种子液，将菌种种子液接入发酵培养基中，在28℃条件下振荡发酵培养4‑10天，初始pH4.0‑8.0，装瓶量30‑60％，接种量5‑20％，转速100‑300r/min。2.黄菇菌丝多糖的提取采用超声波辅助热水浸提法提取黄菇中的黄菇菌丝多糖，在浸提温度70‑95℃、料液比1∶10‑1∶30(g/mL)、超声时间5‑20min、浸提次数2‑4次、提取时间0.5‑3h条件下提取多糖，得到多糖浸提液。3.黄菇菌丝多糖的浓缩取多糖浸提液离心取上清液，将上清液浓缩至原体积的1/4左右，得到多糖浓缩液。4.黄菇菌丝多糖的脱蛋白采用Sevag法去除多糖浓缩液中的游离蛋白，按照多糖浓缩液的1/4体积加入Sevag试剂(氯仿∶正丁醇＝4∶1)，充分混合搅拌，离心除掉变性蛋白质，反复多次直到蛋白质除尽为止，得到多糖提取液。5.黄菇菌丝多糖的脱色采用离子交换法对多糖提取液进行脱色，得到多糖流出液。6.黄菇菌丝多糖的分离精制将脱色后的多糖流出液采用半透膜逆向流水透析，之后加入一定体积的乙醇，在4℃下静置24h，离心所得沉淀用无水乙醇多次洗涤，之后将得到的沉 淀在50℃下干燥至恒重，即得多糖干品。