大规模筛查CCR5-Δ32基因型的方法及其引物

摘要

本发明的目的在于提供一种大规模筛查CCR5-Δ32基因型的方法及其引物，所述方法通过荧光PCR直接判断有无曲线增长或观察荧光PCR后的溶解曲线，从而判断是否存在CCR5-Δ32基因型，以及该基因型是否是纯合子或杂合子，从标本加样到完成荧光PCR反应及结果判断，在1个半小时内完成，同时避免了PCR方法最大的缺点，即产物的污染问题，使得结果更准确可信，因此该方法非常适合对标本的大规模初筛。同时可以采用初筛和复查相结合的策略，既在初筛的基础上，可对疑似CCR5-Δ32基因型的标本，进行测序验证，从而保证结果的可靠性。该方法具有快速、准确、简单、成本低、能大规模进行筛选的优点，有利于基层现场的使用和推广。

主权项

大规模筛查CCR5‑Δ32基因型的引物，其特征在于，包括针对筛查CCR5‑Δ32基因型设计的五组特异性PCR引物，具体为：第一组：用于荧光染料PCR溶解曲线分析法筛查CCR5‑Δ32基因型的两条引物，序列为SEQ ID No：1和SEQ ID NO：2；第二组：用于构建CCR5‑Δ32基因型阳性质粒的快速突变基因位点引物，序列为SEQ ID No：3和SEQ ID NO：4；第三组：用于荧光染料PCR法直接筛查CCR5‑Δ32基因型的四条引物，序列为SEQ ID No：5、7、9和11；第四组：用于Taqman探针荧光PCR法筛查CCR5‑Δ32基因型的Taqman探针，序列为SEQ ID No：12；第五组：用于DNA测序法筛查CCR5‑Δ32基因型的引物，序列为SEQ ID No：13。