一种用于扩增CIK的方法及一种CIK细胞制剂

摘要

本发明属于免疫细胞体外培养领域，涉及一种用于扩增CIK的方法以及一种CIK细胞制剂，具体采用如下程序：a、应用淋巴细胞分离液分离出PBMC，将培养袋预先用CD3mAb和CD137mAb包被，将分离得到的PBMC用无血清培养基调整浓度之1×106/ml，并加入IFN-γ至终浓度为1000u/ml，转移至培养袋中培养；b、培养24小时后加入CD3mAb、CD28mAb、CD137mAb，并加入配置的无血清培养基，配置的无血清培养基中添加了IL-1α、IL-2、IL-12及IL-15，连续培养7-21天后，离心收集获得的CIK细胞；c、b步骤的培养过程中，每隔3天对培养袋中的细胞进行计数，并根据细胞浓度补加培养基，每隔6天添加CD3mAb，CD28mAb，CD137mAb至相应浓度；从而提高了CIK细胞增殖细胞倍数和细胞毒活性。

主权项

一种用于扩增CIK的方法，其特征在于，按如下程序实施：a、应用淋巴细胞分离液分离出PBMC，将培养袋预先用50ng/ml‑30ug/ml 的CD3mAb和10ng/ml‑20ug/ml 的CD137mAb包被，将分离得到的PBMC用无血清培养基调整浓度之l×106／ml，并加入IFN‑γ至终浓度为1000u/m1，转移至培养袋中培养；b、培养24小时后加入5ng/ml‑5ug/ml的CD3mAb、5ng/ml‑5ug/ml的cD28mAb、1ng/ml‑lug/ml的CD137mAb，并加入配置的无血清培养基，配置的无血清培养基中添加了10u/ml‑1000u/ml的IL‑1α、50u/ml‑3000u/m1的IL‑2、1ng/ml‑l00ng/ml的IL‑12及1ng/ml‑1000ng/ml的IL‑15，连续培养7‑21天后，离心收集获得的CIK细胞；c、b步骤的培养过程中，每隔3天对培养袋中的细胞进行计数，并根据细胞浓度补加培养基，每隔6天添加CD3mAb，CD28mAb，CD137mAb至相应浓度。