Inducción de la expresión génica utilizando una mezcla de azúcares a alta concentración

摘要

Un método para preparar una composición de alimentación inductora, para inducir la expresión de un genbajo el control de un promotor inducible por soforosa o un promotor inducible por gentiobiosa, comprendiendo dichométodo las etapas de (a) proporcionar un preparado de celulasa completa de Trichoderma reesei que es un caldo de fermentaciónfinal, opcionalmente aislado de las células de la fermentación; (b) mezclar una solución de glucosa pura que comprende de 50% a 75% (p/p) de glucosa con el preparado decelulasa completa de Trichoderma reesei para dar una primera mezcla, teniendo la primera mezcla una actividad debeta-glucosidasa de 1,5 UI/ml a 180 UI/ml; y (c) incubar la primera mezcla a una temperatura de 50°C a 75°C y durante un tiempo suficiente para producir lacomposición de alimentación inductora; en donde el preparado de celulasa completa comprende (i) una o más beta-glucosidasas; y (ii) una o más endoglucanasas y una o más celobiohidrolasas; en donde la composición de alimentación inductora comprende soforosa en una concentración que se encuentra enel intervalo de 2 g/L a 25 g/L, y gentiobiosa en una concentración que se encuentra en el intervalo de 35 g/L a 60g/L.