应用电泳中介微分析技术分离测定普瑞巴林手性异构体的方法

摘要

本发明涉及一种普瑞巴林手性异构体衍生化及分离检测方法，所述方法将手性衍生化试剂Nα-(5-氟-2，4-二硝基苯基)-氨基酸类化合物溶于可加速双分子亲核取代反应的促进剂中，应用电泳中介微分析技术，于毛细管柱头以电泳为驱动力，使手性衍生化试剂与普瑞巴林及其手性异构体混合并进行衍生化反应，反应完毕，直接在线对衍生物采用非手性毛细管胶束电动色谱分离测定。本发明所提供的方法适合分离检测含普瑞巴林手性异构体的普瑞巴林原料药及含普瑞巴林的制剂等，具有样品和手性衍生化试剂的用量极少，分析成本较低，分析过程简单、快速，易于控制和自动化，分析结果重现性好等特点。

主权项

一种应用电泳中介微分析技术分离测定普瑞巴林手性异构体的方法，包括以下步骤：1）取普瑞巴林或含普瑞巴林的制剂适量，用水溶解并稀释后，配制成含普瑞巴林的样品溶液；2）取手性衍生化试剂适量，用六甲基磷酰三胺溶解并配制成手性衍生化试剂溶液；3）取手性衍生化试剂溶液在25mbar压力下进样1～10s，再取含普瑞巴林的样品溶液在25mbar压力下进样4s，最星后取手性衍生化试剂溶液在25mbar压力下进样1～10s，每一次进样完毕、下次进样或加操作电压前，应先将毛细管进样端在六甲基磷酰三胺中浸一下，普瑞巴林与手性衍生化试剂的用量摩尔比为1：1～1：12；4）将毛细管两端插入含操作缓冲液的小瓶中，加电压5kV并维持5～10s，使普瑞巴林与手性衍生化试剂混合，停止加电压，使普瑞巴林在45～55℃柱温下进行衍生化反应5～15min；5）反应完毕，直接加电压进行非手性毛细管胶束电动色谱分离测定；所述手性衍生化试剂为Nα‑(5‑氟‑2,4‑二硝基苯基)‑氨基酸类化合物。