高抗氧化及降血压活性乳酸菌发酵乳制品的生产方法

摘要

本发明涉及一种利用基因工程技术在乳酸菌中生产超氧化物歧化酶（Superoxidedismutase，SOD）及S型褶皱臂尾轮虫血管紧张素转化酶抑制（Angiotensin-ConvertingEnzymeInhibitor，ACEI）肽，进而制备具有高效抗氧化、降血压功效的发酵乳制品的新方法。具体内容包括：通过PCR方法扩增获得大肠杆菌Fe-SOD编码基因，进一步采用重叠延伸（splicingbyoverlapextension，SOE）PCR法，构建Usp45信号肽-SOD-(G4S)3-ACEI肽融合蛋白基因，连接到乳酸菌表达质粒pMG36e后，转入乳酸菌中，培养并发酵纯牛乳。本发明所获得的基因工程菌可以高效表达SOD及ACEI肽，同时其培养液及牛乳发酵产品均具有明显的SOD与ACEI活性。

主权项

一种SOD及ACEI活性乳酸菌发酵乳制品的生产方法，其特征在于按如下的步骤进行：（1）构建SOD‑ACEI肽融合蛋白基因，将其插入到乳酸菌表达质粒pMG36e的多克隆位点，获得pMG36e‑SOD‑ACEI重组质粒；（2）将pMG36e‑SOD‑ACEI质粒转化乳酸菌，得到重组乳酸菌；（3）培养该重组乳酸菌，并发酵纯牛乳；（4）收集发酵液，对SOD及ACEI活性进行检测；其步骤（1）的SOD‑ACEI肽融合蛋白基因序列如SEQ ID NO:1所示；重组质粒pMG36e‑SOD‑ACEI表达产物的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。