黄花乌头转基因苗及其获得方法

摘要

本发明公开了一种黄花乌头苗及其获得方法。本发明提供的方法，包括如下步骤：1)将黄花乌头发根进行诱导培养，得到愈伤组织；2)将步骤1)得到的愈伤组织进行脱分化培养，得到黄花乌头苗。本发明的实验证明，本发明利用黄花乌头的发根进行成苗，其成苗率高，且所获得的黄花乌头再生苗在普通的组织培养基中即能进行生长繁殖，繁殖速度快，生产周期短(约30天左右)，不受自然条件的影响，可以实现工业集约化生产，克服了人工种植黄花乌头时所具有的繁殖速度慢、育种周期长、抗性低、遗传稳定性差等缺陷；此再生苗具有广阔的应用前景和利用价值。

主权项

一种培育黄花乌头苗的方法，包括如下步骤：1)将黄花乌头发根进行诱导培养，得到愈伤组织；2)将步骤1)得到的愈伤组织进行脱分化培养，得到黄花乌头苗；所述黄花乌头发根按照如下方法制备：将含有目的外源基因的重组发根农杆菌导入黄花乌头叶片中，得到黄花乌头发根；所述含有目的外源基因的重组发根农杆菌为发根农杆菌(Agrobacterium rhizogenes)A4；所述步骤1)和步骤2)中，所述培养的温度均为22℃‑25℃，所述培养的光照强度均为1000lux‑1500lux，所述培养的光照时间均为11小时/天‑13小时/天，所述培养的时间均为30天‑50天；步骤1)中，所述诱导培养的培养基按照如下方法制备：将萘乙酸、细胞分裂素、水和1/2MS培养基混合得到培养基，所述萘乙酸在所述诱导培养的培养基中的浓度为0.01mg·L‑1‑0.2mg·L‑1，所述细胞分裂素在所述诱导培养的培养基中的浓度为0.5mg·L‑1‑10mg·L‑1；步骤2)中，所述脱分化的培养基按照如下方法制备：将6‑苄氨基嘌呤、水和1/2MS培养基混合，所述6‑苄氨基嘌呤在所述脱分化的培养基中的浓度为0.5mg·L‑1‑10mg·L‑1。