一种重组质粒及应用其制备的重组溶瘤腺病毒

摘要

本发明公开了一种重组质粒及应用其制备的重组溶瘤腺病毒。本发明中，将DNA片段甲(自上游至下游包括两个元件：U6启动子元件、1504-siRNA编码元件)和DNA片段乙(TERTp启动子元件、E1A基因元件、E1B55K-E1B19K基因元件)插入溶瘤腺病毒载体，得到了重组溶瘤腺病毒载体。将该重组溶瘤腺病毒载体转染细胞并进行培养，可以得到含有重组溶瘤腺病毒的培养上清。该重组溶瘤腺病毒中，由肿瘤特异启动子启动(TERTp启动子)腺病毒早期复制基因E1A的表达，即在正常细胞中不表达或表达量极低，当在肿瘤细胞中表达时同时表达1504-siRNA。该重组腺病毒具有很好的肿瘤细胞特异性，能够发挥溶瘤和抑瘤的双重作用，具有很高的医疗价值。

主权项

一种DNA片段，由DNA片段甲、DNA片段乙和抗性筛选基因组成，所述DNA片段甲为序列表的序列1所示的DNA分子；所述DNA片段乙为序列表的序列2所示的DNA分子；所述抗性筛选基因为卡那霉素抗性基因。