用于构建测序文库的系统与方法

摘要

本发明涉及基因工程领域，提供了用于构建测序文库的系统与方法。所述系统与方法包括接头元件及其应用于构建测序文库的方法。接头元件是从5’到3’端依次包含分叉区与配对区的分叉型双链核酸接头，其分叉区的两条单链各包含至少一个扩增引物结合位点，配对区包含至少一个酶切识别位点。本发明的接头元件在文库构建过程中能够避免接头元件自连现象以及非目标接头元件-DNA片段复合物的出现。

主权项

一种构建测序文库的方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：A.对源DNA进行片段化处理，以产生目的DNA片段；B.目的DNA片段两端连上第一接头元件形成接头元件‑DNA复合物，加入扩增引物进行扩增，得到扩增产物；所述第一接头元件是从5’到3’端依次包含分叉区和配对区的分叉型双链核酸接头；所述分叉区的两条单链各包含至少一个扩增引物结合位点；所述配对区包含至少一个II s型限制性内切酶酶切识别位点；C.酶切扩增产物得到酶切产物，环化酶切产物得到环化产物；D.酶切环化产物得到DNA构建物；E.在DNA构建物两端连接第二接头元件形成配对末端片段；F.解旋形成单链，得到配对末端测序文库。