摘要 |
Способ получения и очистки плацентарной щелочной фосфатазы, заключающийся в экстрагировании фермента из сырья, термообработки экстракта, фракционировании белков сульфатом аммония и последующей очистки фермента методом препаративного электрофореза, отличающийся тем, что после экстрагирования фермента из плаценты 3М хлоридом калия и прогревания первичного экстракта в течение 10 мин при 65°C, проводят повторную термообработку экстракта в присутствии сульфата кадмия 0,14%-ной концентрации в течение 1-3 мин при 65°C с последующим охлаждением колбы под струей воды, добавляют в экстракт сульфат аммония до 30% насыщения, отделяют осадок центрифугированием, надосадочную жидкость, минуя стадию диализа, подвергают гидрофобной хроматографии на колонке с фенил-сефарозой, проводят элюцию фермента с колонки 0,02М трис-глициновым электродным буфером рН 8,6, а ферментсодержащий элюат подвергают препаративному электрофорезу в 7%-ном полиакриламидном геле. |