水环境中致病菌高效富集方法

摘要

本发明公开了一种高效富集回收水环境中致病菌的技术与方法，其主要内容包括：(1)新型载带阳电荷滤料的制备方法；(2)滤器的制作方法；(3)过滤浓集系统的组装；(4)洗脱液的配置方法；(5)浓集回收致病菌的操作方法。本发明的技术和方法能够高效的富集回收各种水环境如自来水、洁净水源水、污染较重的水体及污水中的致病菌，浓集回收效率稳定：对于较洁净水体回收率能达到90％以上，污染较重水体回收率能达到80％以上。且本发明中的滤料经过简单处理能够反复使用，其它的器材也可多次使用，因此本发明中的技术和方法简单、经济、实用，非常适合实验室及现场使用。

主权项

水环境中致病菌高效富集方法，其特征是包括如下步骤：(1)载带阳电荷滤料氢氧化镁铝的制备①氢氧化镁铝胶体的制备a.将AlCl3·6H2O和MgCl2·6H2O按摩尔比为1∶3溶解到一定体积去离子水中，使Al3+和Mg2+的终浓度分别达到0.1mol/L和0.3mol/L，在150～500转/分钟的搅拌下，缓慢均匀的加入一定浓度的NaOH溶液若干至不再产生沉淀为止，用盐酸调节pH至8.0左右，继续搅拌2h后进行静置老化；b.静置老化过程中隔天倾倒出上清液，并用去离子水补足体积后搅拌均匀，共进行3次换水操作，持续时间约5天左右；②滤料的制备a.将老化完成后的氢氧化镁铝胶体进行离心，离心参数为6000rpm×10min；倾倒出上清，保留氢氧化镁铝沉淀；b.将氢氧化镁铝沉淀置于55℃烘箱烘烤48小时左右至基本干燥；c.将干燥的氢氧化镁铝沉淀置于马弗炉中进行烘烤，烘烤过程及参数如下：200℃下烘烤2小时，400℃烘烤2小时然后600℃烘烤4小时；d.破碎氢氧化镁铝块体，并过孔径0.45mm和0.2mm标准筛，保留直径为0.20～0.45mm的颗粒；e.氢氧化镁铝颗粒在马弗炉中以800℃烘烤4小时后自然冷却；(2)滤器及过滤系统的组建①滤器的制作a.直径2～6cm一定长度的有机玻璃管一端封闭，插入直径0.5cm长约2cm的硬质塑料管作为出水管，距离出水端1cm左右固定一与有机玻璃管内径相同的200目左右的不锈钢网承载滤料并可过滤出水；有机玻璃管另一端加工出一段螺纹，并配直径相当的塑料螺帽，该螺帽中间开一小孔并配合安装直径0.5cm长度2cm的硬质塑料进水管；b.打开螺帽装入一定量的氢氧化镁铝滤料后重新拧紧螺帽；②过滤系统的组建过滤系统由高位水槽、灭菌容器、塑料导管、滤器及流量控制装置组成，以橡胶软管连接各个部件；(3)洗脱液的配制a.称取一定量的Na2HPO4和NaH2PO4完全溶解到一定体积去离子水中，配成pH值为6.5左右的缓冲溶液；b.在上述缓冲溶液中加入分析纯的吐温‑80并搅拌均匀，使吐温‑80的终浓度达到0.5％；c.配好的洗脱液分装后在121℃下高压灭菌20分钟；(4)过滤浓集方法a.一定量的水样置于高位水槽中，调节流量控制使水样以匀速流过滤器，用灭菌容器收集过滤水样；b.从过滤系统中取出滤器，将10mL洗脱液注入滤器中，封闭出、入水管后震荡洗脱滤料约3分钟后将洗脱液放出；洗脱操作进行4～5次，每次均用10mL洗脱液；c.将多次洗脱的溶液混合作为最终的浓集液。