一种血清中痕量内源性磷酸化肽的富集方法

摘要

本发明涉及生化分析领域，公开了一种复杂体系中痕量内源性磷酸化肽的富集方法。本发明首次采用滤膜(ultrafiltration membrane)去除血清中的大量高丰度蛋白、DNA和RNA等大分子量干扰化合物，在降低样品复杂度的同时，减少了在上样过程中与磷酸化肽竞争作用位点的干扰物，显著地提高了金属氧化物富集内源性磷酸化肽的选择性和检测灵敏度。与此相比，血清样品不经过滤膜过滤，金属氧化物富集不到内源性磷酸化肽。该方法结合滤膜截留和金属氧化物富集实现了血清中痕量内源性磷酸化肽的高灵敏度、高选择性富集和检测，为肿瘤生物标志物的发现奠定了方法学基础。

主权项

一种血清中痕量内源性磷酸化肽的富集方法，其特征在于：首先将血清样品采用滤膜截留，然后利用金属氧化物富集滤膜滤过液中的痕量内源性磷酸化肽；所述滤膜的截留分子量在5000‑20000Da之间；所述金属氧化物材料包括氧化钛、氧化锆、氧化铝、或者这些金属的复合金属氧化物中的一种或二种以上。