GS-DHFR双基因筛选表达载体及其构建方法与应用

摘要

本发明“GS-DHFR双基因筛选表达载体及其构建方法与应用”，属于生物技术领域。所述的表达载体主要依次含有：多克隆位点、DHFR序列、GS序列。本发明还公开上述表达载体的构建方法和应用，通过该载体可以利用分子克隆技术快速构建携带目的基因的GS-DHFR双基因筛选表达载体，转染哺乳动物细胞后利用GS-DHFR双基因筛选和扩增系统，实现目的基因在哺乳动物细胞中的高水平表达。

主权项

GS‑DHFR双基因筛选表达载体，骨架载体为pOpti VEC，依次含有CMV启动子，外源基因插入位点、CMV启动子控制的二氢叶酸还原酶基因和SV40启动子控制的谷氨酰胺合成酶基因，谷氨酰胺合成酶基因下游为SV40polyA信号序列，所述二氢叶酸还原酶基因序列与外源基因插入位点之间还有IRES序列，所述谷氨酰胺合成酶基因插入在pOpti VEC的Pvu II位点，所述谷氨酰胺合成酶基因上游带有SV40启动子，下游为SV40polyA信号序列。