主权项 |
一种低聚果糖菊粉纯度的鉴定方法,其特征在于:通过将菊粉用菊粉酶酶解,然后用HPLC法确定低聚果糖菊粉酶解前、酶解后样品中果糖和葡萄糖的含量,分别计算果糖和葡萄糖酶解前后含量差异,果糖酶解前后百分比差值与葡萄糖酶解前后百分比差值之和乘以0.9,折算成菊粉的纯度;具体包括下述步骤: 1)、配制果糖、葡萄糖对照品溶液:配制成浓度为10mg/ml的果糖对照品溶液,和浓度为1mg/ml的葡萄糖对照品溶液; 2)、 色谱条件的设定:检测器:示差折光检测器 检测器温度50℃;色谱柱:Phenomenex Rezex Ca2+ ;柱温:80℃;流动相:纯化水;流速:0.50ml/min;进样量:25μ1;运行时间:30~40min; 3)、菊粉样品处理:供试品(1):精密称取菊粉样品1.0g置100ml容量瓶中,加入适量水,加热溶解,冷却至温室,用定容至刻度; 供试品(2):向浓度为5~30%的菊粉溶液,按每克菊粉加入菊粉酶1~30U混合,在40~70℃水浴中酶解1~36小时;4)、HPLC分析计算果糖和葡萄糖的含量:按色谱条件供试品(1)进样,得到菊粉酶解前果糖、葡萄糖的峰面积,参照对照品的面积,计算菊粉中的果糖、葡萄糖含量;按色谱条件供试品(2)进样,得到菊粉酶解后果糖、葡萄糖的峰面积,参照对照品的面积,计算菊粉中的果糖、葡萄糖含量;5)菊粉纯度的鉴别:供试品(2)酶解后样品的果糖和葡萄糖含量减去供试品(1)样品的果糖和葡萄糖含量,再乘以0.9,从而确定菊粉样品的纯度;观察其是否符合正常范围,由此判断供试品菊粉纯度是否合格;所述0.9为菊粉中脱水果糖或脱水葡萄糖与果糖或葡萄糖的分子量的比率。 |