H5N1型高致病性禽流感的纳米量子点检测方法

摘要

本发明公开了一种H5N1型高致病性禽流感的纳米量子点检测方法，属于属于检验检疫领域。该方法包括如下步骤：(1)制备和纯化H5N1型禽流感单克隆抗体或多克隆抗体；(2)制备水溶性羧基化纳米量子点；(3)纳米量子点标记H5N1型禽流感单克隆抗体或多克隆抗体；(4)样品测定。本发明的优点是：纳米量子点应用于H5N1型高致病性禽流感检测的诊断方法，该方法快速、稳定、便于高通量检测、条件要求低、操作简便，易于推广，具有操作简单、快速和灵敏度高等特点。该方法的建立将为我国高致病性禽流感的监测和诊断提供了一种有效的手段，在进出口检疫上具有良好的推广和应用前景。

主权项

用于检测H5N1型高致病性禽流感病毒的纳米量子点标记抗体的制备方法，其特征在于包括如下步骤：(1)制备和纯化H5N1型禽流感单克隆抗体或多克隆抗体；(2)制备水溶性羧基化纳米量子点；(3)纳米量子点标记H5N1型禽流感单克隆抗体或多克隆抗体；所得单克隆抗体或多克隆抗体即可应用于样品中H5N1型高致病性禽流感病毒的测定；所述(2)制备水溶性羧基化纳米量子点，是采用如下方法制备的：a.制备CdSe核壳量子点；b.制备CdSe/CdS核壳量子点；c.巯基乙酸修饰CdSe/CdS量子点；d.双亲性高分子疏水自组装改性量子点；e.超声乳化改性量子点；所述d.双亲性高分子疏水自组装改性量子点的方法为：取量子点粉末和双亲性三嵌段高分子溶解在3∶1的氯仿/乙醇溶液中，搅拌以除去氯仿有机溶剂，当氯仿被除去后加入PBS缓冲溶液，再超声分散3分钟，所得到的溶液再过0.22um膜以除去未结合的高分子，过膜后溶液再用超滤管浓缩后再过凝胶色谱柱，进一步除去未结合的高分子；所述(3)纳米量子点标记H5N1型禽流感单克隆抗体或多克隆抗体的方法为：制备醛基化玻片；利用交联剂EDC和sulfo‑NHS采用共价键连接的方法进行抗体的量子点标记。