共轭亚油酸的发酵方法及所用菌株

摘要

本发明涉及一种利用酿酒酵母表面展示系统表达亚油酸异构酶，并利用该酶催化合成t10,c12-共轭亚油酸的方法。本发明构建了含有来源于痤疮丙酸杆菌（Propionibacterium acnes）的亚油酸异构酶基因（pai）的表达载体，获得了含有该表达载体的酿酒酵母菌株。经诱导培养后，亚油酸异构酶在酿酒酵母中得到展示表达，将该酶加入到含有底物亚油酸的缓冲液中，进行催化反应，生成t10,c12-共轭亚油酸。本发明利用微生物表面展示系统将亚油酸异构酶连接在酿酒酵母细胞壁上，使细胞外底物与酶充分接触，提高催化效率，并且能够获得具有生理活性的单一异构体，简化分离纯化步骤，降低生产成本。

主权项

一种在细胞壁表达共轭亚油酸异构酶基因的基因工程菌，其特征在于：含有亚油酸异构酶基因，基因序列见序列3，表达载体的pYD1，宿主菌为酿酒酵母EBY100。