单唾液酸四己糖神经节苷脂的制备方法及其应用

摘要

本发明涉及单唾液酸四己糖神经节苷脂的制备方法及其应用。该方法以阳离子树脂（优选为Dowex50）为介质，在含有氯仿的酸性混合水溶液中，将动物脑组织来源的神经节苷脂混合物转化为富含GM1的混合物，所得转化产物中GM1的含量由转化前的7-10％提高到72-80％，进而减少7-12倍的动物脑组织用量（生产相同量的GM1），显著降低生产成本。

主权项

一种单唾液酸四己糖神经节苷脂的制备方法，包括下述步骤： (1)将神经节苷脂混合物用乙醇、水、氯仿组成的混合溶剂溶解为浓度50‑150g/L的混合溶液，调pH值2.0‑3.0，搅拌混匀，制得神经节苷脂混合物溶液，其中，所述的神经节苷脂混合物选自牛脑神经节苷酯混合物、猪脑神经节苷脂混合物的任一种或其组合，所述混合溶剂中水：乙醇：氯仿的体积比为60‑30:8‑2: 1，优选混合溶液的浓度为100g/L，优选所述混合溶液的pH值为2.4‑2.8，更优选所述混合溶剂中水：乙醇：氯仿的体积比为45:5:1； (2)将阳离子树脂用纯净水漂洗干净，沥干水分后，再用5％的HCl溶液浸泡3h‑5h后，用纯净水漂洗至中性，沥干水分，制得酸活化处理后的阳离子树脂，其中，优选所述的阳离子树脂为强酸性阳离子交换树脂，更优选为Dowex 50；(3)以神经节苷脂混合物的质量计，在步骤1）制得的神经节苷脂混合物溶液中加入10‑30％的阳离子树脂，升温至60℃‑80℃，搅拌，反应1h‑4h，调节pH值至7.5‑9.0，制得神经节苷脂混合物的酸水解液，优选神经节苷脂混合物溶液中加入20％的阳离子树脂，更优选升温至65℃‑68℃； （4）收集神经节苷脂混合物的酸水解液中的上清液，将其浓缩至400‑600g/L，在浓缩物中加入浓缩物体积的7‑9倍量的冷丙酮，将浓缩物沉淀过夜，收集沉淀，干燥，即得，优选将神经节苷脂混合物的酸水解液中的上清液的浓缩至500g/L。