Procedimientos para obtener estructuras de carbohidrato de tipo mamífero mediante ingeniería genética

摘要

Un procedimiento para producir una glicoproteína qUn procedimiento para producir una glicoproteína que comprende la expresión de un ácido nucleico queue comprende la expresión de un ácido nucleico que codificala glicoproteína en una célula huésped eu codificala glicoproteína en una célula huésped eucariótica inferior que tiene actividad disminuida cariótica inferior que tiene actividad disminuida o agotada de una o másenzimas seleccionadas de ento agotada de una o másenzimas seleccionadas de entre: (a) dolicil-P-Man:Man5GlcNAc2-PP-dolicil alfa-re: (a) dolicil-P-Man:Man5GlcNAc2-PP-dolicil alfa-1,3 manosiltransferasa (alg3); (b) dolicil-P-Man:M1,3 manosiltransferasa (alg3); (b) dolicil-P-Man:Man6GlcNAc2-PP-dolicil alfa-1,2 manosiltransferasa an6GlcNAc2-PP-dolicil alfa-1,2 manosiltransferasa (alg9); o (c) dolicil-P-Man:Man7GlcNAc2-PP-dolicil(alg9); o (c) dolicil-P-Man:Man7GlcNAc2-PP-dolicil alfa-1,6 manosiltransferasa (alg12); expresando a alfa-1,6 manosiltransferasa (alg12); expresando además dicha célulahuésped: (I) un dominio catalítidemás dicha célulahuésped: (I) un dominio catalítico de α-1,2-manosidasa fusionado a un péptidco de α-1,2-manosidasa fusionado a un péptido dirigido que se dirige al retículoendoplásmico (o dirigido que se dirige al retículoendoplásmico (RE) o aparato de Golgi en la célula huésped; y (IIRE) o aparato de Golgi en la célula huésped; y (II) un dominio catalítico de GlcNAc transferasa I (G) un dominio catalítico de GlcNAc transferasa I (GnT I) fusionado a un péptido dirigido que se dirignT I) fusionado a un péptido dirigido que se dirige al retículoendoplásmico (RE) o aparato de Golgi e al retículoendoplásmico (RE) o aparato de Golgi en la célula huésped; para producir una glicoproteen la célula huésped; para producir una glicoproteína que tiene estructuras de núcleo GlcNAcMan4GlcNína que tiene estructuras de núcleo GlcNAcMan4GlcNAc2 o GlcNAcMan3GlcNAc2. Ac2 o GlcNAcMan3GlcNAc2.