发明名称 一种白鹤芋体细胞胚诱导并再生植株的方法
摘要 一种白鹤芋体细胞胚诱导并再生植株的方法,它涉及一种体细胞胚诱导植株再生的方法。方法:1.取白鹤芋幼嫩试管苗,将叶片或叶柄,切成小片段进行诱导,获得体细胞胚;2.将体细胞胚继代培养于体细胞胚增殖培养基中大量增殖;3.将体细胞胚转移至植株再生培养基上培养获得完整小植株。本发明的体细胞胚诱导率达97%~100%,初次培养外植体表面即可形成多达50~200个体细胞胚,诱导效率显著提高;所获体细胞胚的植株再生率达85%~95%。本发明解决了现有白鹤芋体细胞胚诱导效率低、外植体材料采集不便的问题。
申请公布号 CN102388805B 申请公布日期 2013.05.01
申请号 CN201110267084.1 申请日期 2011.09.09
申请人 广东省农业科学院花卉研究所 发明人 于波;刘金梅;刘晓荣;廖飞雄
分类号 A01H4/00(2006.01)I 主分类号 A01H4/00(2006.01)I
代理机构 广州粤高专利商标代理有限公司 44102 代理人 陈卫
主权项 一种白鹤芋体细胞胚诱导并再生植株的方法,利用外植体材料诱导,其特征在于,所采用的外植体材料为白鹤芋叶片或叶柄或其混合;所述方法包括如下步骤:(1)体细胞胚诱导:取白鹤芋幼嫩试管苗,将叶片切成1~10毫米的条块,或将叶柄切成1~10毫米的截段,然后接种于体细胞胚诱导培养基中,在温度24~30 ℃的黑暗环境中培养3~6周,获得体细胞胚;   (2)体细胞胚的增殖:将获得的体细胞胚继代培养于体细胞胚增殖培养基中,在温度24~30 ℃的黑暗环境中培养2~4周后,体细胞胚大量增殖;(3)植株再生:将获得的体细胞胚接种至植株再生培养基中,在温度24~30 ℃、光照强度为1000~1400 lux,每日10~14小时光照环境中培养2~4周,体细胞胚萌发,获得完整再生植株;步骤(1)所述体细胞胚诱导培养基为以MS培养基为基本培养基,同时每1升培养基中还含有1.0~3.0毫克的6‑苄基氨基腺嘌呤、0.5~2.0毫克的2,4‑二氯苯氧乙酸、20~40克蔗糖和6~9克的琼脂,或者每1升培养基中还含有0.05~0.25毫克的噻苯隆、0.5~2.0毫克的2,4‑二氯苯氧乙酸、20~40克蔗糖和6~9克的琼脂,培养基的pH值为5.6~6.0;步骤(2)所述体细胞胚增殖培养基是以MS培养基为基本培养基,同时每1升培养基中还含有1.0~3.0毫克的6‑苄基氨基腺嘌呤、0.5~1.0毫克的2,4‑二氯苯氧乙酸、20~40克的蔗糖和6~9克的琼脂,或者每1升培养基中还含有0.05~0.25毫克的噻苯隆、0.5~1.0毫克的2,4‑二氯苯氧乙酸、20~40克的蔗糖和6~9克的琼脂,培养基的pH值为5.6~6.0;步骤(3)所述植株再生培养基为以MS培养基为基本培养基,同时每1升培养基中还含有0.5~1.0毫克的6‑苄基氨基腺嘌呤、0.1~0.2毫克的α‑奈乙酸、20~40克的蔗糖和6~9克的琼脂,pH值为5.6~6.0。
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