一种烟草及烟草制品中游离烟碱的测定方法

摘要

本发明公开了一种烟草及烟草制品中游离烟碱的测定方法。该方法采用聚二甲基硅氧烷/苯乙烯为萃取材料对烟草样品粉末进行固相微萃取，并进行气相色谱/质谱联用仪定量分析，得到游离烟碱测定结果。方法评价数据表明，本方法具有测定结果准确，重现性好、对游离烟碱与质子态烟碱之间的平衡破坏少等优点。

主权项

一种烟草及烟草制品中游离烟碱的测定方法，包括以下步骤：（1）标准工作曲线的绘制①空白样品的制备：将50 g烟丝磨成粉末，加入1 L浓度2%的 NaOH水溶液超声提取1 h，重复提取5次，每次提取完毕后，用纱布过滤提取液，将滤得的烟末进行下一次提取；提取完成后将烟末烘干至10%～15%的含水率，再将烟末放入温度为22 ℃，相对湿度为RH60%的恒温恒湿箱中平衡48 h，得到空白烟末样品；②标准溶液的配制：以正己烷为溶剂配制浓度为100 g/L、50 g/L、25 g/L、10 g/L、5 g/L、1 g/L的烟碱标准溶液；以正己烷为溶剂配制浓度为10 g/L及5 g/L的氘代甲苯溶液；③标准曲线的建立：取6个棕色顶空瓶，每个顶空瓶中放置0.2 g的空白烟末样品，分别准确加入1 μL浓度为10 g/L的氘代甲苯溶液，再分别准确加入1 μL浓度为100 g/L、50 g/L、25 g/L、10 g/L、5 g/L、1 g/L的烟碱标准溶液，立即密封后将烟末混合均匀；将6个顶空瓶在30 ℃平衡2 h后进行分析测试；将6个样品的游离烟碱与氘代甲苯的响应值比与烟碱的浓度进行线性回归，得到标准工作曲线，曲线不强制归零，线性相关系数R2须大于0.999；（2）待测样品的准备①将待测烟草样品粉碎成粉末，将样品烟末放入温度为22 ℃，相对湿度为RH60%的恒温恒湿箱平衡48 h；②称取0.200 g待测样品烟末置于20 mL棕色顶空瓶中，加入2 μL浓度为5 g/L的氘代甲苯溶液，立即密封后混合均匀，在30 ℃条件下平衡2 h后，进行游离烟碱的分析测试；（3）游离烟碱仪器分析条件①固相微萃取针：萃取材料为：聚二甲基硅氧烷/苯乙烯材料，部分交联，材料膜厚为65 μm；②固相微萃取条件：预平衡温度：30 ℃，预平衡时间：600 s，萃取时间：1800 s，脱附时间：20 s，洗针时间：900 s，洗针温度：250 ℃，洗针气体：纯度≥99.999%的高纯氮气，洗针压力设置为：0.2 Mpa；③色谱分析条件：以纯度≥99.999%的氦气为载气，恒流模式，流量为1.5 mL/min；进样口温度设定为250 ℃；采用分流进样方式，分流比为40:1，程序升温条件为初始温度50 ℃，保持2 min，以30 ℃/min的升温速率升至210 ℃，保持2 min，以30 ℃/min的升温速率升至240 ℃，保持3 min；④质谱分析条件：电离方式采用电子轰击源，电离能量为70 eV；离子源温度为230 ℃；四极杆温度为150 ℃；传输线温度为250 ℃；选择质荷比为84对游离烟碱进行定量，质荷比为133和162对游离烟碱进行辅助定量；选择质荷比为98对氘代甲苯进行定量，质荷比为100和70对氘代甲苯进行辅助定量；（4）分析结果计算记录测试样品游离烟碱及氘代甲苯的响应值，根据步骤1所建立的标准曲线，计算得出样品中游离烟碱的含量。