发明名称 |
检测结直肠癌血清miRNA-128的专用引物、试剂盒及方法 |
摘要 |
本发明公开了一种检测结直肠癌血清miR-128的专用引物,包括miR-128的逆转录引物和检测引物、U6的逆转录引物和检测引物、miRNA-16的逆转录引物和检测引物,如SEQ IDNO:1~9所示。一种检测结直肠癌血清miR-128的专用试剂盒,包括上述引物,以及RNA分离液。一种检测结直肠癌血清miR-128表达量的方法,步骤如下:(1)将待检测的血清标本与等体积RNA分离液混合,16000g离心10分钟,分离上清液;(2)RT-PCR扩增;(3)制作标准曲线(4)计算:得出基因的校正起始拷贝数Q;将miR-128的Q值与内参基因U6、miR-16的Q值的几何平均数相比,得到miR-128的相对表达量。本发明的检测方法,为结直肠癌的早期发现、早期治疗提供了重要的参考依据。 |
申请公布号 |
CN103074431A |
申请公布日期 |
2013.05.01 |
申请号 |
CN201310012196.1 |
申请日期 |
2013.01.14 |
申请人 |
山东大学齐鲁医院 |
发明人 |
王传新;张欣;王海燕 |
分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I |
主分类号 |
C12Q1/68(2006.01)I |
代理机构 |
济南圣达知识产权代理有限公司 37221 |
代理人 |
彭成 |
主权项 |
一种检测结直肠癌血清miR‑128的专用引物,其特征在于:包括:(1)miR‑128的逆转录引物和检测引物,逆转录引物的序列如SEQ ID NO:1所示,检测引物的序列如SEQ ID NO:2、SEQ ID NO:3所示:miR‑128‑RT:5’‑GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACAAAGAG‑3’;miR‑128‑F:5’‑GGCTCACAGTGAACCGGT‑3’;miR‑128‑R:5’‑GTGCAGGGTCCGAGGT‑3’;(2)U6的逆转录引物和检测引物,逆转录引物的序列如SEQ ID NO:4所示,检测引物的序列如SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6所示:U6‑RT:GTGCTCGCTTCGGCAGCACATATAC;U6‑F:GTGCTCGCTTCGGCAGCACATATAC;U6‑R:AAATATGGAACGCTTCACGAATT;(3)miRNA‑16的逆转录引物和检测引物,逆转录引物的序列如SEQ ID NO:7所示,检测引物的序列如SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9所示:miRNA‑16‑RT:5’‑GTCGTATCCAGTGCAGGGTCCGAGGTATTCGCACTGGATACGACCGCCAA‑3’;miRNA‑16‑F:5’‑CGCCTAGCAGCACGTAAATA‑3’;miRNA‑16‑R:5’‑GTGCAGGGTCCGAGGT‑3’。 |
地址 |
250014 山东省济南市历下区文化西路107号 |