发明名称 一种高产α-葡萄糖苷酶的黑曲霉菌株的筛选方法
摘要 本发明公开一种高产α-葡萄糖苷酶的黑曲霉菌株的筛选方法,其特征在于,依次包括以下步骤:(1)挑出黑曲霉菌株经紫外诱变的单菌落;(2)初筛;(3)复筛;(4)摇瓶验证实验;其中,使用邻甲氧基苯基-α-D-葡萄糖苷作为初筛、复筛中诱变筛选时酶分解反应的底物。本发明具有快速准确且高通量筛选α-葡萄糖苷酶黑曲霉菌株的优点。
申请公布号 CN102168023B 申请公布日期 2013.05.01
申请号 CN201110025115.2 申请日期 2011.01.24
申请人 华东师范大学;上海东圣食品有限公司 发明人 陈艳娟;常忠义;高红亮;牛延宁;步国建;韦妮
分类号 C12N1/14(2006.01)I;C12R1/685(2006.01)N 主分类号 C12N1/14(2006.01)I
代理机构 上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙) 31257 代理人 董红曼
主权项 1.一种高产α-葡萄糖苷酶的黑曲霉菌株的筛选方法,其特征在于,依次包括以下步骤:(1)挑选400-600株经紫外诱变的黑曲霉单菌落;(2)初筛;(3)复筛;(4)摇瓶验证实验;其中,以邻甲氧基苯基-α-D-葡萄糖苷作为所述初筛、复筛中诱变筛选时酶分解反应的底物,所述邻甲氧基苯基-α-D-葡萄糖苷如结构式(I)所示:<img file="FSB00000990283200011.GIF" wi="678" he="524" />其中,所述初筛包括:将所述经紫外诱变的黑曲霉单菌落发酵培养,加入底物邻甲氧基苯基-α-D-葡萄糖苷进行反应,以NaOH溶液作为终止液,将重氮盐溶液加入酶反应体系进行显色,测定酶活,以未经诱变的菌株做对照,确定高产菌株。
地址 200062 上海市普陀区中山北路3663号