发明名称 |
一种高产α-葡萄糖苷酶的黑曲霉菌株的筛选方法 |
摘要 |
本发明公开一种高产α-葡萄糖苷酶的黑曲霉菌株的筛选方法,其特征在于,依次包括以下步骤:(1)挑出黑曲霉菌株经紫外诱变的单菌落;(2)初筛;(3)复筛;(4)摇瓶验证实验;其中,使用邻甲氧基苯基-α-D-葡萄糖苷作为初筛、复筛中诱变筛选时酶分解反应的底物。本发明具有快速准确且高通量筛选α-葡萄糖苷酶黑曲霉菌株的优点。 |
申请公布号 |
CN102168023B |
申请公布日期 |
2013.05.01 |
申请号 |
CN201110025115.2 |
申请日期 |
2011.01.24 |
申请人 |
华东师范大学;上海东圣食品有限公司 |
发明人 |
陈艳娟;常忠义;高红亮;牛延宁;步国建;韦妮 |
分类号 |
C12N1/14(2006.01)I;C12R1/685(2006.01)N |
主分类号 |
C12N1/14(2006.01)I |
代理机构 |
上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙) 31257 |
代理人 |
董红曼 |
主权项 |
1.一种高产α-葡萄糖苷酶的黑曲霉菌株的筛选方法,其特征在于,依次包括以下步骤:(1)挑选400-600株经紫外诱变的黑曲霉单菌落;(2)初筛;(3)复筛;(4)摇瓶验证实验;其中,以邻甲氧基苯基-α-D-葡萄糖苷作为所述初筛、复筛中诱变筛选时酶分解反应的底物,所述邻甲氧基苯基-α-D-葡萄糖苷如结构式(I)所示:<img file="FSB00000990283200011.GIF" wi="678" he="524" />其中,所述初筛包括:将所述经紫外诱变的黑曲霉单菌落发酵培养,加入底物邻甲氧基苯基-α-D-葡萄糖苷进行反应,以NaOH溶液作为终止液,将重氮盐溶液加入酶反应体系进行显色,测定酶活,以未经诱变的菌株做对照,确定高产菌株。 |
地址 |
200062 上海市普陀区中山北路3663号 |