乙肝病毒的树突状细胞治疗性疫苗制备方法及其制备的乙肝病毒的树突状细胞治疗性疫苗

摘要

本发明公开了一种乙肝病毒的树突状细胞治疗性疫苗的制备方法及其制备的乙肝病毒的树突状细胞治疗性疫苗，包含步骤：构建HBcAg与Fc双基因共表达重组真核载体；将获得的双基因共表达重组真核载体加入皂苷Quil A，加入胆固醇及卵磷脂，冰浴超声处理使溶液充分混匀并乳化，再用PBS透析，所得微絮状物为形成的免疫刺激复合物；获得的免疫刺激复合物活化刺激树突状细胞获得所述细胞治疗性疫苗。该疫苗通过高效转染树突状细胞，生成的融合蛋白通过Fc片段再次高效靶向树突状细胞，从而激活树突状细胞，促进乙肝病毒核心抗原特异性T细胞免疫应答，高效诱导免疫细胞的抗病毒复制的能力，可作为乙肝病毒治疗性疫苗。

主权项

一种乙肝病毒的树突状细胞治疗性疫苗的制备方法，其特征在于，包含步骤：1）构建乙肝病毒核心抗原HBcAg与免疫球蛋白G的Fc双基因共表达重组真核载体，构建载体包括：将HBcAg全长cDNA插入含有IRES的双基因共表达真核载体的IRES上游，再将Fc全长cDNA插入该真核载体的IRES下游，获得HBcAg和Fc双基因共表达重组真核载体；2）制备免疫刺激复合物：将步骤1）中获得的乙肝病毒核心抗原HBcAg与免疫球蛋白G的Fc双基因共表达重组真核载体加入皂苷Quil A，再加入胆固醇及卵磷脂，冰浴超声处理使溶液充分混匀并乳化，再用PBS透析，所得微絮状物即为形成的免疫刺激复合物；3）步骤2）获得的免疫刺激复合物活化刺激树突状细胞获得所述细胞治疗性疫苗。