复合酶水解法制备大豆与蚕蛹复合寡肽的清洁生产方法

摘要

本发明公开了一种复合酶水解法制备大豆与蚕蛹复合寡肽的清洁生产方法，属于酶工程和农产品加工技术领域。该方法以大豆分离蛋白与脱脂蚕蛹粉为原料，采用去离子水将二者按2.5:1~3.5:1的比例配制成8~10%(wt)的醪液，85~95℃加热8~12min使蛋白适度变性，迅速冷却后，加入2.5~3.5%(wt)（占底物干重的百分比）的复合酶于50~55℃酶解5~6h，然后升温至85~95℃维持10~15min进行灭酶，采用板框过滤与袋式精滤进行固液分离，滤液再依次进行超滤分级、纳滤浓缩、喷雾干燥，得到不同分子量的寡肽。本发明采用复合酶对大豆分离蛋白与脱脂蚕蛹粉进行水解，采用膜技术进行分级分离与浓缩，生产全程无需酸碱，无脱盐与脱色工艺，实现了寡肽的清洁生产。

主权项

一种复合酶水解法制备大豆与蚕蛹复合寡肽的清洁生产方法，其特征在于：以大豆分离蛋白与脱脂蚕蛹粉为原料，首先将其配制成一定浓度的醪液，搅拌均匀后对其进行加热变性，冷却后加入一定量的复合酶进行水解，然后采用板框过滤与袋式精滤进行固液分离，滤液再依次进行超滤分级、纳滤浓缩、喷雾干燥，得到不同分子量的大豆与蚕蛹复合寡肽，其生产工艺包括以下步骤：1) 采用去离子水，将大豆分离蛋白与脱脂蚕蛹粉按2.5:1~3.5:1配制成为8~10%(wt)的醪液，搅拌均匀后于85~95℃加热8~12min使蛋白质进行变性；2) 溶液冷却后，将复合酶添加到料液中，按底物干料计加入2.5~3.5%(wt)的复合酶，于50~55℃酶解5~6h，然后升温至85~95℃维持10~15min进行灭酶，灭酶后迅速冷却至45~50℃，所述的复合酶的酶系组成是碱性蛋白酶80000~100000u/g、中性蛋白酶30000~35000u/g、风味蛋白酶100~127LAPU/g，所述复合酶由市售单酶配制而成，其载体采用精制硅藻土；3) 酶解完毕后，采用板框过滤与袋式精滤进行固液分离，得到澄清的滤液；4) 滤液采用截断分子量为5000Da超滤膜进行超滤，分子量大于5000Da的组分被截留，这一组分回流至酶解罐在下一批次继续酶解；透过截断分子量为5000Da超滤膜的组分继续采用截断分子量为2000Da超滤膜进行分级分离；5）分子量大于2000Da的组分被截断分子量为2000Da超滤膜截留，这一组分直接进行喷雾干燥；透过截断分子量为2000Da超滤膜的组分继续采用截断分子量为1000Da超滤膜进行分级分离；6）分子量大于1000Da的组分被截断分子量为1000Da超滤膜截留，这一组分直接进行喷雾干燥；透过截断分子量为1000Da超滤膜的组分进一步采用纳滤膜进行浓缩，氨基酸与小肽等组分被纳滤膜截留，直接进入喷雾干燥；水和无机盐可以透过纳滤膜；7) 将各级截留物分别进行喷雾干燥得到不同分子量的生物活性肽粉；所述喷雾干燥的条件为：料液温度为50‑55℃，进口温度为180‑200℃，出口温度为70‑80℃。