一种对悬浮细胞的肌动蛋白丝进行染色的方法

摘要

本发明涉及一种对悬浮细胞的肌动蛋白丝进行染色的方法。本发明提供的对悬浮细胞的肌动蛋白丝进行染色的方法包括以下步骤：A)收集悬浮细胞(条斑紫菜的单孢子)，通过离心的方法对单孢子进行收集，在800～1000rpm条件下离心收集需要染色的悬浮细胞；B)配置染色液，用微丝缓冲液稀释肌动蛋白丝的荧光标记物质Alexa Fluor 488phalloidin至5UmL-1，添加体积百分含量为2％的甘油以增强染色效果，其中所述微丝缓冲液包括100mM PIPES、10mM EGTA、5mM MgSO4和0.3M mannitol，所述微丝缓冲液的pH为6.9；C)将收集到的细胞悬浮到上述染色液中，在室温、黑暗条件下染色10分钟后，重新在800～1000rpm条件下离心收集细胞。本发明提供的染色方法可以对单孢子的肌动蛋白丝进行很好的标记，而且离心的过程可以去除细胞碎片和多余的染色液，使观察结果变得更加清晰明了。

主权项

一种对悬浮细胞的肌动蛋白丝进行染色的方法，包括以下步骤：A)收集悬浮细胞，通过离心的方法对单孢子进行收集，在800～1000rpm条件下离心收集需要染色的悬浮细胞；B)配置染色液，用微丝缓冲液稀释肌动蛋白丝的荧光标记物质Alexa Fluor488phalloidin至5U mL‑1，添加体积百分含量为2％的甘油以增强染色效果，其中所述微丝缓冲液包括100mM PIPES、10mM EGTA、5mM MgSO4和0.3Mmannitol，所述微丝缓冲液的pH为6.9；C)将收集到的细胞悬浮到上述染色液中，在室温、黑暗条件下染色10分钟后，重新在800～1000rpm条件下离心收集细胞。