一种水体中类固醇污染物的降解方法

摘要

本发明提供了一种水体中类固醇污染物的降解方法。所述方法包括：将睾丸酮丛毛单胞菌（Comamonastestosteroni）改良的工程菌株P8制成降解菌悬液，接种到含有类固醇污染物的水体中。所述的水体中类固醇污染物的浓度需≥0.1ng/L，pH值为7.0±0.5，温度25～30℃。接种后并搅拌或振荡水体系，使水体中类固醇污染物降解，48±1h后降解率可以达到68.32%～70.22%，且接种工程菌密度呈指数下降，随着时间的推移活细胞数量越来越少，最终可达10-100cfu/L。本发明具有成本低、操作简单、降解效率高、适应性强等优点。

主权项

一种睾丸酮丛毛单胞菌工程菌在降解水体中类固醇污染物中的应用，其特征在于：将睾丸酮丛毛单胞菌改良的工程菌株P8制成菌悬液，接种到含有类固醇污染物的水体中，使水体中类固醇污染物降解；所述工程菌株P8保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏日期2008年1月25日，保藏号为CGMCC NO.2365；所述降解的具体步骤如下：（1）细菌培养：取出保存于－80 ℃的工程菌菌种，吸取200 μL加入到装有4 mL LB 液体培养基的灭菌试管中，在30 ℃，180 r/min培养条件下恒温摇床过夜；将活化的菌株转接到含有抗生素的 LB 液体培养基中,添加60 μg/mL Amp，在30 ℃，180 r/min条件下恒温摇床过夜培养；细菌悬浮液的制备：过夜培养的工程菌株，调节其菌液的OD600 值为1.0， 2000 rpm/min离心5 min，收集菌体悬浮于0.85%的NaCl中制成菌悬液；对检测到的类固醇污染物富集最低浓度≥0.1ng/L的污染水体，调节其pH值为7.0±0.5，按污染水体体积的0.5%取相应体积的菌悬液，接种工程菌并搅拌或振荡体系，使水体中类固醇污染物降解；所述类固醇污染物为雌酮、雌二醇、雌三醇。