发明名称 |
一种用磁性微球固定化米糠谷氨酸脱羧酶制备γ-氨基丁酸的方法 |
摘要 |
一种用磁性微球固定化米糠谷氨酸脱羧酶制备γ-氨基丁酸的方法,属于米糠深加工技术领域。在传统制备γ-氨基丁酸(GABA)的方法中,所得产品蛋白、糖等杂质含量高,GABA纯度低,因此需要一种方法来提高GABA产品的纯度。本发明以稻谷加工后的副产物——新鲜米糠为原料,提取谷氨酸脱羧酶,以磁性壳聚糖微球作为固定化材料,来固定谷氨酸脱羧酶,并用此固定化酶来转化底物谷氨酸钠为GABA。该方法具有固定化酶易分离、可反复回收利用、反应过程温和,且GABA制备液成分相对简单等优点,对实现米糠的综合利用价值和提高其经济效益有重要的意义。 |
申请公布号 |
CN103045666A |
申请公布日期 |
2013.04.17 |
申请号 |
CN201310023893.7 |
申请日期 |
2013.01.23 |
申请人 |
江南大学 |
发明人 |
张晖;张媛媛;齐希光;钱海峰;王立 |
分类号 |
C12P13/00(2006.01)I;C12N11/10(2006.01)I;C12N9/88(2006.01)I |
主分类号 |
C12P13/00(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
一种用磁性微球固定化米糠谷氨酸脱羧酶制备γ‑氨基丁酸的方法,其特征是将米糠用酶提取液提取出谷氨酸脱羧酶,与制备好的磁性壳聚糖微球进行微粒反应,得到磁性固定化谷氨酸脱羧酶;将此固定化酶与反应液混合,加入0.01‑0.05mol/L的谷氨酸钠作为底物,摇床反应得到γ‑氨基丁酸制备液,具体工艺如下:(1)提取谷氨酸脱羧酶:新鲜米糠加入酶提取液,提取谷氨酸脱羧酶;(2)磁性壳聚糖微球的制备:0.5g磁性纳米微粒与20mL2.5%的壳聚糖乙酸溶液混合,在搅拌下缓慢加入到80mL液体石蜡和4mL Span‑80混合溶液中,常温搅拌30min,加入10mL8%的戊二醛,40℃搅拌1h,再用1mol/LNaOH溶液调pH至9‑10,70℃搅拌2h,用磁铁吸出微球,并先后用石油醚、丙酮、蒸馏水反复洗涤,于60℃下真空干燥;(3)固定谷氨酸脱羧酶:0.05mol/LPBS缓冲液浸泡磁性壳聚糖微球12h,使其充分溶胀;加入戊二醛进行交联,用PBS缓冲液反复洗涤磁性微球;再加入一定浓度的酶液进行固定,用PBS缓冲液反复洗涤磁性微球;(4)制备γ‑氨基丁酸:将固定化酶与反应液混合,加入0.01‑0.05mol/L的谷氨酸钠作为底物,摇床反应得到γ‑氨基丁酸制备液。 |
地址 |
214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号 |