一种辅助选育抗条锈病小麦品种的方法及其专用PCR试剂

摘要

本发明公开了一种利用分子标记辅助筛选抗条锈病小麦的方法及其专用引物。本发明提供的辅助筛选抗条锈病小麦的引物对序列见引物序列表(表1)。本发明提供的辅助筛选抗条锈病小麦的方法在常规育种为基础上进行的，并不影响育种家的选育过程，只是在F2和F6代时，经育种家选择之后，利用所述引物对候选单株进行分子标记检测，仅保留含有所述两个抗条锈病基因的单株，从而帮助育种家更高效的选出含有多个抗条锈病基因的优良株系，提高所选株系抗病的持久性。本发明在小麦品种周8425B中发现了一个新的抗条锈病基因Yrcaas及其专用引物，该基因位于小麦1B染色体上，定位于SSR标记Xbarc8和Xgwm582之间，这两个标记可用于辅助抗条锈病育种工作中。本发明的抗病基因的专用引物将在小麦抗病育种中发挥重要作用。

主权项

一种选育或辅助选育抗条锈病和/或高产小麦的方法，包括如下步骤：1）以周麦24小麦和周麦22进行杂交，得到F1代；2）将步骤1）得到的F1代小麦进行自交，得到F2代小麦；3）引物对1、所述引物对2、所述引物对3、所述引物对4和所述引物对5分别对步骤2）得到的F2代小麦进行PCR扩增，检测PCR扩增产物；若PCR扩增的产物为如下A）‑E）中的5种，则所述F2代小麦为或候选为抗条锈病F2代小麦；若PCR扩增的产物不为如下A）‑E）中的5种，则所述F2代小麦为或候选为非抗条锈病F2代小麦：A）所述引物对1扩增得到200 bp的PCR产物；B）所述引物对2扩增得到150bp的PCR产物；C）所述引物对3扩增得到560bp的PCR产物；D）所述引物对4扩增得到350bp的PCR产物；E）所述引物对5扩增得到1598bp的PCR产物； 所述引物对1中的一条引物的核苷酸序列为序列表中的序列1，所述引物对中的另一条引物的核苷酸序列为序列表中的序列2；所述引物对2中的一条引物的核苷酸序列为序列表中的序列3，所述引物对中的另一条引物的核苷酸序列为序列表中的序列4；所述引物对3中的一条引物的核苷酸序列为序列表中的序列5，所述引物对中的另一条引物的核苷酸序列为序列表中的序列6；所述引物对4中的一条引物的核苷酸序列为序列表中的序列7，所述引物对中的另一条引物的核苷酸序列为序列表中的序列8；所述引物对5中的一条引物的核苷酸序列为序列表中的序列9，所述引物对中的另一条引物的核苷酸序列为序列表中的序列10；4）将步骤3）得到的候选为抗条锈病F2代小麦进行自交得到F3代小麦，将所述F3代小麦自交得到F4代小麦，将所述F4代小麦自交得到F5代小麦，将所述F5代小麦自交得到F6代小麦；5）用步骤3）所述的引物对1至5分别对得到的F6代小麦进行PCR扩增，得到PCR产物，检测PCR扩增产物；若PCR扩增的产物为如下A）‑E）中的5种，则所述F6代小麦为或候选为抗条锈病F6代小麦；若PCR扩增的产物不为如下A）‑E）中的5种，则所述F6代小麦为或候选为非抗条锈病F6代小麦：A）所述引物对1扩增得到200 bp的PCR产物；B）所述引物对2扩增得到150bp的PCR产物；C）所述引物对3扩增得到560 bp的PCR产物；D）所述引物对4扩增得到350 bp的PCR产物；E）所述引物对5扩增得到1598 bp的PCR产物；6）将所述候选为抗条锈病F6代小麦进行自交，得到F7代小麦，筛选产量高于周麦22的F7代小麦，即为高产、抗条锈病小麦；步骤3）中的所述PCR扩增，均以F2代小麦的基因组DNA为模板；步骤5）中的所述PCR扩增，均以F6代小麦的基因组DNA为模板；所述条锈病的病原菌为小麦条锈菌（Puccinia striiformis f. sp. tritici）；所述检测均采用琼脂糖凝胶电泳。