一种提取RNA的方法和试剂盒

摘要

本发明涉及分子生物学领域，公开了一种提取RNA的方法和试剂盒。提取RNA的方法为样品与裂解液混匀，离心收集上清与1/2体积无水乙醇混匀，结合于0.45μm玻璃纤维素膜后，用去蛋白液和漂洗液洗涤，最后洗脱吸附的RNA。上述方法，还包括裂解细胞与助提剂混匀，离心去除多糖多酚类物质。提取RNA的试剂盒包括裂解液、去蛋白液、漂洗液、洗脱液，还包括助提剂。本发明所述方法简单快捷，不使用有毒试剂，适用范围广，加入助提剂有效去除多糖多酚类物质，分离高质量RNA。本发明所述试剂盒不含有毒试剂、适用范围广，针对富含多糖多酚的植物材料提取RNA效果优于国外试剂盒，而且成本低，适用于广大的实验室和科研工作。

主权项

一种提取RNA的方法，包括：步骤1：样品与裂解液混匀，离心，所述裂解液由浓度为10~50mmol/L，pH值6.5~8.0的Tris‑HCl、3~5mol/L异硫氰酸胍和1%β‑巯基乙醇组成；步骤2：取步骤1所得上清，与1/2体积RNase‑free的无水乙醇混匀，与0.45μm玻璃纤维素膜结合；步骤3：用去蛋白液和漂洗液洗涤所述玻璃纤维素膜，所述去蛋白液含有浓度为5~50mmol/L，pH值6.5~8.0的Tris‑HCl、0.1~0.5mol/L异硫氰酸胍和5%~20%的无水乙醇，所述漂洗液含有浓度为5~50mmol/L，pH值6.5~8.0的Tris‑HCl、50~200mmol/LNaCl和50%~80%的无水乙醇；步骤4：洗脱所述玻璃纤维素膜上吸附的RNA。