发明名称 基于20个三等位基因SNP遗传标记的法医学复合检测试剂盒
摘要 本发明属法医学领域,具体涉及一种基于20个三等位基因SNP遗传标记的法医学复合检测试剂盒。本发明试剂盒由分离包装的复合扩增引物混合物、多重单碱基延伸反应引物混合物、等位基因分型标准物混合物、复合扩增反应混合液、以及单碱基延伸反应混合液构成。所述试剂盒通过单管内的复合扩增反应和多重单碱基延伸反应,利用法医遗传实验室通用的毛细管电泳平台,可一次性快速、准确地获得生物检材的20个三等位基因SNP遗传标记的分型,确定检材的个体来源,为法医个人识别提供一种新的技术手段。该试剂盒在法医学领域具有良好的应用前景。
申请公布号 CN102337345B 申请公布日期 2013.04.17
申请号 CN201110346459.3 申请日期 2011.11.04
申请人 四川大学 发明人 侯一平;扎拉嘎白乙拉;云利兵;颜静;翟仙敦;罗海玻;李英碧
分类号 C12Q1/68(2006.01)I 主分类号 C12Q1/68(2006.01)I
代理机构 成都虹桥专利事务所(普通合伙) 51124 代理人 梁鑫
主权项 1.基于20个三等位基因SNP遗传标记的法医学复合检测试剂盒,其特征在于:由分离包装的复合扩增引物混合物、多重单碱基延伸反应引物混合物、等位基因分型标准物混合物、复合扩增反应混合液和单碱基延伸反应混合液构成;所述复合扩增引物混合物,包含了20个三等位基因SNP遗传标记的共计40条扩增引物,各条引物的核苷酸序列分别为下表中SEQ ID No.1至SEQ ID No.40所示:<img file="FDA00002493726100011.GIF" wi="1406" he="2522" /><img file="FDA00002493726100021.GIF" wi="1411" he="621" />所述多重单碱基延伸反应引物混合物包含20个三等位基因SNP遗传标记的共计20条单碱基延伸引物,这些单碱基延伸引物的核苷酸序列分别为下表中SEQ ID No.41至SEQ ID No.60所示:<tables num="0001"><table><tgroup cols="4"><colspec colname="c001" colwidth="25%" /><colspec colname="c002" colwidth="25%" /><colspec colname="c003" colwidth="25%" /><colspec colname="c004" colwidth="25%" /><tbody><row><entry morerows="1">  序号 </entry><entry morerows="1"> SNP基因座的rs号 </entry><entry morerows="1">  各多重单碱基延伸引物序列 </entry><entry morerows="1">  序列表中的序号 </entry></row><row><entry morerows="1">  1 </entry><entry morerows="1"> rs1630312 </entry><entry morerows="1">  AGGCAGGCATCAAAGTGCA </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.41 </entry></row><row><entry morerows="1">  2 </entry><entry morerows="1"> rs3091244 </entry><entry morerows="1">  8C-GCACCCAGATGGCCACT </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.42 </entry></row><row><entry morerows="1">  3 </entry><entry morerows="1"> rs2069945 </entry><entry morerows="1">  TCAGG-GCTACACTATCTCTGTCTCAGTTTC </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.43 </entry></row><row><entry morerows="1">  4 </entry><entry morerows="1"> rs6001030 </entry><entry morerows="1">  8C-TATCTATTGATAAACATGAGTTCTT </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.44 </entry></row><row><entry morerows="1">  5 </entry><entry morerows="1"> rs140676 </entry><entry morerows="1">  10C-CTGTGTCTTGGAGGAAAATTGAGAG </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.45 </entry></row><row><entry morerows="1">  6 </entry><entry morerows="1"> rs356167 </entry><entry morerows="1">  14C-CATTGCTGTTGTTGTTCTTCTTCTT </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.46 </entry></row><row><entry morerows="1">  7 </entry><entry morerows="1"> rs941454 </entry><entry morerows="1">  18C-TTTCCTTTTTGCAGTGTTAAAAACC </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.47 </entry></row><row><entry morerows="1">  8 </entry><entry morerows="1"> rs10045 </entry><entry morerows="1">  22C-GTAATTTAATAAAAAAAACTAAGGA </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.48 </entry></row><row><entry morerows="1">  9 </entry><entry morerows="1"> rs3743842 </entry><entry morerows="1">  27C-TCATTACATGAGACCCTGTGTGTC </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.49 </entry></row><row><entry morerows="1">  10 </entry><entry morerows="1"> rs2298556 </entry><entry morerows="1">  37C-ACTTTACGGGACTGAAAA </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.50 </entry></row><row><entry morerows="1">  11 </entry><entry morerows="1"> rs3816662 </entry><entry morerows="1">  35C-CAGAGTTAGACATCAAAGTTGCCG </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.51 </entry></row><row><entry morerows="1">  12 </entry><entry morerows="1"> rs230722 </entry><entry morerows="1">  38C-ATGCAATTACACAACAGAACACTAT </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.52 </entry></row><row><entry morerows="1">  13 </entry><entry morerows="1"> rs10811897 </entry><entry morerows="1">  41C-CTTTCATAACTTCTCAATTCTGACA </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.53 </entry></row><row><entry morerows="1">  14 </entry><entry morerows="1"> rs17287498 </entry><entry morerows="1">  43C-GAAAATTAACTGCATTTGTTTTTAC </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.54 </entry></row><row><entry morerows="1">  15 </entry><entry morerows="1"> rs385780 </entry><entry morerows="1">  51C-TTCTCTCTGAGCTCCAGACAC </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.55 </entry></row><row><entry morerows="1">  16 </entry><entry morerows="1"> rs11141033 </entry><entry morerows="1">  51C-GGATATGGGAAAAGACTCTTCTGC </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.56 </entry></row><row><entry morerows="1">  17 </entry><entry morerows="1"> rs4540055 </entry><entry morerows="1">  58C-CACTTTTGAATACCACGCCTGAC </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.57 </entry></row><row><entry morerows="1">  18 </entry><entry morerows="1"> rs3812847 </entry><entry morerows="1">  62C-TAGCTCCCAAGCTGGTTGATTT </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.58 </entry></row><row><entry morerows="1">  19 </entry><entry morerows="1"> rs2032582 </entry><entry morerows="1">  62C-TATTTAGTTTGACTCACCTTCCCAG </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.59 </entry></row><row><entry morerows="1">  20 </entry><entry morerows="1"> rs2278786 </entry><entry morerows="1">  65C-ATTCTTTAAATGAGGTGCATAGTCT </entry><entry morerows="1">  SEQ ID No.60 </entry></row></tbody></tgroup></table></tables>所述各序列中“-”符号前为加尾序列,阿拉伯数字其后字母表示加尾序列中重复的碱基类型,阿拉伯数字表示该碱基的重复次数;所述的等位基因分型标准物混合物由20个三等位基因SNP遗传标记的等位基因分型标准物构成,包括60个荧光素标记DNA片段,对应20个三等位基因SNP遗传标记的所有已知60 个等位基因;所述60个荧光素标记DNA片段各自所对应的SNP基因座的rs号、核苷酸序列及标记的荧光素类型如下表所示;<img file="FDA00002493726100031.GIF" wi="1646" he="2796" /><img file="FDA00002493726100041.GIF" wi="1659" he="309" />所述各序列中,“-”符号前为加尾序列;阿拉伯数字其后字母表示加尾序列中重复碱基的类型,阿拉伯数字表示该碱基的重复次数。 
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