主权项 |
一种可简易检测自然水样中多种赤潮藻的试剂盒,其特征在于,包括膜分类基因芯片条,含检测赤潮异湾藻、东海原甲藻、新月菱形藻、共生甲藻、中肋骨条藻、柔弱角毛藻、三叶原甲藻、塔玛亚历山大藻共8种赤潮藻的种特异性探针、阴性对照探针和阳性对照探针,每条探针2个重复;核酸制备所需试剂:自然样品核酸粗提试剂:2%(m/v)CTAB,0.5%(v/v)β‑mercaptoethanol,1.4M NaCl,20mM EDTA,100mM Tris‑Cl,10U RNase Inhibitor;5×NASBA Buffer:0.2M Tris‑HCl,60mM MgCl2,0.35M KCl2,25mM DTT,20mM dNTP;NTP:10mM ATP,10mM GTP,10mM CTP,6.5mM UTP,3.5mMDigoxigenin‑11‑UTP;5×Primer mix:75%DMSO,1μM NASBA‑P1,1μM NASBA‑P2,25mM DTT,20mM dNTP;4×Enzyme mix:1.5M山梨醇,0.42mg/ml BSA,16U/ml RNase H,6400U/ml T7RNA Polymerase,1280U/ml RT‑M‑MLV,4000U/ml RNA inhibitor;核酸杂交所需试剂:RNA变性剂:1.5M NaCl,0.15M二水柠檬酸三钠,pH7.0,0.15M甲醛;杂交液:1%Blocking Reagent II,0.75M NaCl,0.075M二水柠檬酸三钠,50μg/ml鲑精DNA;Buffer II:1%Blocking Reagent II,0.1M Tris,0.15NaCl,pH7.5;碱性磷酸酶标记的DIG抗体:AP‑抗DIG;20×SSC:3M NaCl,0.3M二水柠檬酸三钠,pH7.0;10×Buffer I:1.0M Tris,1.5M NaCl,pH7.5;10×Buffer III:1.0M Tris,1.0M NaCl,0.5M MgCl2,pH9.5;10%SDS;显色剂:2.81%NBT,2.19%BCIP,70%二甲基甲酰胺。 |