群体感应信号分子抑制剂产生菌的鉴别方法及应用

摘要

本发明属于生物技术领域，公开了群体感应信号分子抑制剂产生菌的鉴别方法及应用。该方法通过将含有微生物的样品接种于含有N-酰基高丝氨酸内酯的KG培养基中进行增菌后接种在LB平板上获得单个菌落，采用指示菌紫色色杆菌或农杆菌进行检测，分离菌周围不产生色素表明该菌能够产生群体感应信号分子抑制剂。该技术可用于人和动物上作为疾病预防的益生素的筛选及应用。该技术具有方法简单，能有效控制致病菌致病因子的产生，同时又提高动物粘膜免疫功能，提高饲料利用率的特点。

主权项

一种鉴别产生群体感应信号分子抑制剂的微生物的方法，其特征在于包括下列步骤：a、将含微生物的样品用无菌生理盐水稀释，取100μl接种于10ml含有500μg/L群体感应信号分子N‑酰基高丝氨酸内酯的KG液体培养基中，28‑37℃，200rpm摇床培养24h，转接到相同培养基中，连续3次后将获得的增菌液稀释涂布于LB琼脂平板上，获得单个菌落；b、挑取获得的单个菌落做一字型接种于LB琼脂平板中央，28‑37℃培养12‑24h；c、将5ml含有106CFU/ml指示菌紫色色杆菌(Chromobacterium violaceum)ATCC12472或者农杆菌(Agrobacterium tumfaciens)KYC6的45‑50℃保温的0.5％LB琼脂倾倒于步骤b所获得的平板上，24‑48h培养，在平板中央分离菌周围未产生紫色或者蓝色色素的，说明该菌能产生群体感应信号分子抑制剂。