一种重复使用的质粒提取试剂盒

摘要

一种重复使用的质粒提取试剂盒，涉及一种核酸提取分离技术中使用的质粒提取试剂盒。该试剂盒包括质粒纯化柱、质粒纯化柱配有的系列溶液和菌体裂解液。本发明的主要技术特点是采用由聚合物形成的整体床型质粒纯化柱和与该质粒纯化柱配备的系列溶液。整体床型质粒纯化柱制备简单、传质性能好、耐污染能力强、质粒提取过程方便快捷，且多次提取质粒样品而纯化柱性能无明显改变。本发明有效克服了现有质粒提取试剂盒成本高、质粒提取纯化柱制备复杂、材料传质性能差、利用率有限、容量低、价格昂贵以及无法重复使用的缺陷。

主权项

一种重复使用的质粒提取试剂盒，包括质粒纯化柱、质粒纯化柱配有的系列溶液和菌体裂解液，其特征在于：所述的质粒纯化柱采用整体床型质粒纯化柱，该整体床型质粒纯化柱采用以下方法合成：1)将含有环氧端基的甲基丙烯酸酯类单体或含有环氧端基的丙烯酸酯类单体与交联剂、致孔剂和引发剂混合，得到反应混合物，其中：a.所述交联剂与单体的物质的量的比值为0.25～0.35；b.所述引发剂与单体的物质的量的比值为0.005～0.03；c.所述致孔剂用量占反应混合物体积百分含量的40～80％；2)将上述反应混合物超声混和均匀，加入到塑料纯化柱管中，原位聚合形成整体床，聚合温度控制在50～70℃之间，反应时间为12～24小时；3)聚合反应结束后，利用有机溶剂冲洗整体床；4)将胺类修饰剂溶于有机溶剂，形成修饰液，利用修饰液对整体床进行改性，其中胺类修饰剂占修饰液的体积百分含量为25～75％，修饰温度控制在50～70℃之间，反应时间为12～24小时；5)修饰反应结束后，利用有机溶剂冲洗整体床，得到整体床型质粒纯化柱；所述整体床型质粒纯化柱配有的系列溶液包括平衡液、清洗液、洗脱液、再生液和储存液，其中：所述的平衡液pH 7.0～8.0，平衡液的组分和含量分别为：Tris    10～50mMEDTA    15～20mMNaCl    0.1～0.3M所述清洗液pH 7.0～8.0，清洗液的组分和含量分别为：Tris    10～50mM  EDTA    15～20mMNaCl    0.4～0.7M所述洗脱液pH 7.0～8.0，洗脱液的组分和含量分别为：Tris    10～50mMEDTA    15～20mMNaCl    0.9～1.5M所述再生液的组分和含量分别为：NaOH    0.5～1.5M所述储存液的组分和体积百分含量分别为：乙醇溶液    20～50％；所述交联剂采用三聚异腈尿酸三烯丙酯和三甲基丙烯酸丙三醇酯中的任一种；所述的致孔剂采用饱和烷烃和芳烃中的至少一种；所述的胺类修饰剂采用乙胺、二甲胺、二乙胺和乙二胺中的任一种；所述的引发剂采用偶氮类物质；所述的有机溶剂采用乙醇、甲醇、四氢呋喃或二噁烷。