检测李痘病毒的胶体金免疫试纸条及检测方法

摘要

本发明公开了一种检测李痘病毒的胶体金免疫试纸条及检测方法，该胶体金免疫试纸条：A、从李痘病毒感病材料中提取李痘病毒的RNA；B、用RT-PCR的方法克隆李痘病毒的外壳蛋白基因，然后将其连接到原核表达载体pET29(a)上，得到pET29a-PPV重组载体，以序列测定最终验证阅读框架正确的重组质粒，用以李痘病毒外壳蛋白基因的诱导表达；将pET29a-PPV重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3)；C、用亲和柱法回收特异性表达蛋白，再免疫家兔，获得李痘病毒抗血清；D、采用上述抗血清制备出检测李痘病毒的胶体金免疫试纸条。本发明目的提供一种使用方便，能快速检测李痘病毒的胶体金免疫试纸条和采用该试纸条检测李痘病毒的方法。

主权项

一种检测李痘病毒的胶体金免疫试纸条，其特征在于按以下步骤制备：A、从李痘病毒感病材料中提取李痘病毒的RNA；B、用RT‑PCR的方法克隆李痘病毒的外壳蛋白基因，然后将其连接到原核表达载体pET29(a)上，得到pET29a‑PPV重组载体，以序列测定最终验证阅读框架正确的重组质粒，用以李痘病毒外壳蛋白基因的诱导表达；将pET29a‑PPV重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3)；C、用亲和柱法回收特异性表达蛋白，再免疫家兔，获得李痘病毒抗血清；D、采用上述抗血清制备出检测李痘病毒的胶体金免疫试纸条。