采用环介导等温扩增技术检测猕猴桃溃疡病菌的方法

摘要

本发明涉及采用环介导等温扩增技术检测猕猴桃溃疡病菌的方法，其中该方法包括猕猴桃溃疡病菌DNA的提取，LAMP反应和实时浊度检测，LAMP反应采用六条引物SEQ ID N0.1-6，从分子水平对猕猴桃溃疡病菌进行筛查和检测，其中所述猕猴桃溃疡病菌采自陕西省，本发明根据猕猴桃溃疡病菌的ITS基因设计了LAMP引物，采用环介导等温扩增技术建立了一种快速、灵敏、高度特异的检测猕猴桃溃疡病菌的方法。为猕猴桃溃疡病菌的快速检测提供了新的手段。

主权项

一种采用环介导等温扩增技术检测猕猴桃溃疡病菌的方法，其中该方法包括猕猴桃溃疡病菌DNA的提取，LAMP反应和实时浊度检测，从分子水平对猕猴桃溃疡病菌进行筛查和检测，所述LAMP反应采用如下三对引物中的任意一对引物组：外引物(F3和B3)：SEQ ID NO.1：5’‑CCGATTTTGGGTCTGTAGCT‑3’；SEQ ID NO.2：5’‑GTAAGTGGTGGAGCCAAGC‑3’；内引物(FIP和BIP)：SEQ ID NO.3：5’‑CGCGCTCTGACCAACTTCACCACCCCTGATAAGGGTGAGG‑3’；SEQ ID NO.4：5’‑TACGACACCCGGATACGGGGATCGAACCGCTGACCTCC‑3’；环引物(LF和LB)：SEQ ID NO.5：5’‑GGCAGATTCGAACTGCCGA‑3’；SEQ ID NO.6：5’‑CCATAGCTCAGCTGGGAGA‑3’。