美洲帘蛤多糖的制备方法

摘要

本发明公开一种美洲帘蛤多糖的制备方法，依次按以下步骤进行：制美洲帘蛤肉糜制品；蛤肉糜制品与水匀浆，得到蛤肉糜浆；向蛤肉糜浆中加入木瓜蛋白酶或碱性蛋白酶或复合蛋白酶酶解；用风味酶进一步酶解；向蛤肉酶解液中加入盐酸或氢氧化钠溶液，得到蛤肉酶解中和液；将蛤肉酶解中和液浓缩，离心去沉淀后，添加食盐得到蛤肉酶解盐溶液；向得到的蛤肉酶解盐溶液中加入无水乙醇，得到上清液和沉淀两部分；将沉淀物用丙酮洗涤，用Sevag试剂脱蛋白后，装入截留分子量为6000Da的透析袋中透析24h，得到粗多糖；将所得的粗多糖过DEAE-52纤维素离子交换柱，收集单一糖峰组分并采用Sephadex-G100凝胶层析柱作进一步分离纯化，浓缩，冻干，即得到美洲帘蛤多糖。

主权项

一种美洲帘蛤多糖的制备方法，其特征在于依次按以下步骤进行：a.选取鲜活的美洲帘蛤，洗净后取肉，采用组织捣碎机捣碎，得到蛤肉糜制品；b.蛤肉糜制品与水按质量比为1∶1～3匀浆，得到蛤肉糜浆；c.向蛤肉糜浆中加入木瓜蛋白酶或碱性蛋白酶或复合蛋白酶，采用1～4N氢氧化钠或盐酸调节pH，酶解1～5小时，得到蛤肉酶解液A；d.将得到蛤肉酶解液A采用1～4N氢氧化钠或盐酸调节pH，用风味酶进一步酶解1～3h，得蛤肉酶解液B；e.向蛤肉酶解液B中加入与c和d步骤等体积等当量的盐酸或氢氧化钠溶液，得到蛤肉酶解中和液；f.将蛤肉酶解中和液浓缩至蛋白含量为3～10％，离心去沉淀后，添加食盐，使食盐终浓度达到1～2％，得到蛤肉酶解盐溶液；g.向得到的蛤肉酶解盐溶液中加入3～7倍体积的无水乙醇，摇匀后，在1～6℃下静置12～24小时，采用8000～12000转/分钟离心15～30分钟，得到上清液和沉淀两部分；将沉淀物用丙酮洗涤，用Sevag试剂脱蛋白后，装入截留分子量为6000Da的透析袋中透析24h，得到粗多糖；h.将所得的粗多糖过DEAE‑52纤维素离子交换柱，先用0.02mol/L pH7.4磷酸盐缓冲液洗脱，再以0～2mol/L NaCl溶液进行梯度洗脱，流速为1～2ml/min，采用苯酚～硫酸法跟踪测定多糖，收集单一糖峰组分；i.将得到的单一糖峰组分，采用Sephadex‑G100凝胶层析柱作进一步分离纯化，用蒸馏水洗脱，流速为0.2ml/min，采用苯酚‑硫酸法跟踪测定多糖，用自动收集器收集单一糖峰组分；j.将收集的单一糖峰组分进行浓缩，冻干，即得到美洲帘蛤多糖。