一种氧化型辅酶I的制备方法

摘要

本发明涉及一种氧化型辅酶I的制备方法，该方法使烟酰胺核苷(NR)和三磷酸腺苷二钠盐(ATP-Na2)在pH为5.0~8.0的缓冲溶液中，在烟酰胺核苷激酶(NRK)的催化作用下以及二价金属离子存在下，在温度30℃~40℃下反应得到氧化型辅酶I(NAD+)。本发明采用生物催化的方法，利用烟酰胺核苷激酶一锅法制备氧化型辅酶，反应体系简单，条件温和，具备良好的产业化应用前景。

主权项

一种氧化型辅酶I的制备方法，其特征在于：该方法使烟酰胺核苷和三磷酸腺苷二钠盐在pH为5.0~8.0的缓冲溶液中，在烟酰胺核苷激酶的催化作用下以及二价金属离子存在下，在温度30℃~40℃下反应得到氧化型辅酶I，所述二价金属离子为镁离子或锰离子，所述反应开始时，所述的烟酰胺核苷和三磷酸腺苷二钠盐的浓度分别为5~50 mg/ml和10~50 mg/ml, 所述的烟酰胺核苷激酶以冻干粉形式加入，且加入量为5~10mg酶粉/ml缓冲溶液, 所述制备方法的实施过程如下：取一反应容器，加入缓冲溶液后，依次加入烟酰胺核苷、三磷酸腺苷二钠盐以及烟酰胺核苷激酶以及所述二价金属离子的盐，控制温度30℃~40℃，搅拌反应，利用液相色谱‑质谱联用监测反应的转化率，至检测到三磷酸腺苷消耗完毕，停止反应, 停止反应后，依次经过滤，大孔树脂吸附，冻干处理获得所述氧化型辅酶I。