Procedimiento para producir un péptido modificado

摘要

Método para producir un fragmento de péptido protegido que contiene uno o más aminoácidos o noaminoácidos modificados, en el que al menos un aminoácido o no aminoácido está modificado tal como serepresenta mediante la fórmula 1; -A(R)-, en la que, A representa un aminoácido o un no aminoácido, y Rrepresenta un sustituyente unido a una cadena lateral de A que se introduce para modificación, en el que el no aminoácido es un compuesto seleccionado del grupo que consiste en NH2-CH(CH2OH)-CH3,CH3-CH(R11)-COOH, CH3-CH(R11)-CH3, NH2-(CH2)3CH(CH2OH)-COOH, NH2-(CH2)4-COOH, NH2-C(CH3)2-(CH2)3-COOH, NH2-CH(CH3)-(CH2)2-CH(CH3)-COOH, NH2-(CH2)3CH(CH2OH)-CH3 y NH2-(CH2)3CH(R11)-CH3 en los que R11 representa una cadena lateral de un aminoácido natural, que comprende: (a) preparar, en una resina a base de tritilo, un fragmento de péptido que tiene una secuencia deseada quecomprende aminoácidos o/y no aminoácidos, en el que uno o más grupos funcionales reactivos en unacadena lateral de un aminoácido o un no aminoácido que pueden producir una reacción secundaria nodeseada en la preparación de un fragmento de péptido están protegidos con un grupo protector,seleccionándose el uno o más grupos funcionales reactivos del grupo que consiste en un grupo hidroxilo,un grupo amino, un grupo guanidino, un grupo imidazolilo, un grupo indolilo, un grupo mercapto y un grupocarboxilo, y un grupo funcional reactivo en la cadena lateral de un aminoácido o un no aminoácido A que vaa modificarse con un sustituyente R se protege con un grupo protector de sililo, (b) eliminar el grupo protector de sililo sin escindir el fragmento de péptido de la resina a base de tritilousando un fluoruro de amonio cuaternario, cuando el grupo protector de sililo se introduce en un grupofuncional reactivo en la cadena lateral de un aminoácido o un no aminoácido A que va a modificarse con unsustituyente R, en el que el grupo protector de sililo es t-butildimetilsililo (TBDMS), t-butildifenilsililo(TBDPS), triisopropilsililo (TIPS), triisobutilsililo (TIBS), t-hexildimetilsililo (ThxDMS) o trifenilsililo (TPS), y elfluoruro de amonio cuaternario es fluoruro de tetrabutilamonio (TBAF), fluoruro de tetraetilamonio (TEF) ofluoruro de amonio, (c) modificar la cadena lateral desprotegida con un sustituyente R, y (d) escindir el fragmento de péptido de la resina a base de tritilo en condiciones débilmente ácidas usandouna disolución que contiene ácidos carboxílicos y/o alcoholes fluorados sin eliminación del grupo protector,tal como se define en la etapa (a), en el fragmento de péptido.